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目的:探讨氟西汀对新生SD大鼠海马神经元存活率、形态学及BDNF蛋白分泌的影响。
方法:①进行新生SD大鼠海马神经元原代培养,通过NSE免疫细胞化学染色和尼氏染色鉴定海马神经元;②通过MTT检测不同浓度(0、1、10、20、30、40、50μmol·L<-1>)的氟西汀对培养7天的海马神经元存活率的影响;③在培养24小时的海马神经元中分别加入浓度为0、1、10、20、40μmol·L<-1>的氟西汀,通过倒置相差显微镜观察不同浓度的氟西汀对培养4天的有突起的神经元数目、最长突起长度和胞体长径的影响;④通过ELISA检测10μmol·L<-1>氟西汀对培养7天的海马神经元BDNF蛋白分泌的影响。
结果:①NSE免疫细胞化学染色结果显示海马神经元纯度为90%,尼氏染色结果显示海马神经元胞质呈淡蓝色,胞质内可见多个颗粒状的尼氏体,呈深蓝色;②氟西汀对海马神经元存活率的影响:10μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,海马神经元存活率增加,有显著性差异(P<0.01);1、20μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,海马神经元存活率无显著性差异;30、40、50μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,海马神经元存活率降低,有显著性差异(P<0.01),其中50μmol·L<-1>氟西汀组海马神经元存活率最低(P<0.01);③氟西汀对海马神经元不同形态学的影响:1μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,最长突起长度增加,有显著性差异(P<0.01);10μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,有突起神经元数目、最长突起长度增加,有显著性差异(P<0.01);20μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,最长突起长度降低,有显著性差异(P<0.01);40μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,有突起神经元数目、最长突起长度降低,有显著性差异(P<0.01);④氟西汀对海马神经元BDNF蛋白分泌的影响:10μmol·L<-1>氟西汀组与正常对照组相比,海马神经元BDNF蛋白分泌量增加,有显著性差异(P<0.01)。
结论:①10μmol·L<-1>氟西汀能促进体外培养的新生SD大鼠海马神经元的存活,30、40、50μmol·L<-1>氟西汀抑制体外培养的新生SD大鼠海马神经元的存活;②1、10μmol·L<-1>氟西汀能促进体外培养的新生SD大鼠海马神经元的生长,20、40μmol·L<-1>氟西汀抑制体外培养的新生SD大鼠海马神经元的生长;③10μmol·L<-1>氟西汀能促进体外培养的新生SD大鼠海马神经元BDNF蛋白的分泌。