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菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat)是一种常用中药。但是菊花的种类不同,其作用也不同;为区别菊花的种属和全面控制菊花药材的入药质量标准,本课题运用毛细管电泳电化学检测法研究菊花中的活性成份,运用高效液相色谱法建立菊花药材的指纹图谱,为不同品种菊花的区分提供了依据,并研究了不同种类菊花的抗氧化能力。首先,糖是生命有机体的重要代谢成份,且糖类物质是菊花中较稳定,且较有特征性的化合物,因此首先运用毛细管电泳电化学检测法对不同品种菊花中的甘露醇及糖类进行了研究。实验选取100mmol/L的NaOH溶液为运行液,用200μm铜电极作工作电极,在0.65V(vs. SCE)的电极电位下,七种被测组分-甘露醇、蔗糖、半乳糖、葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、果糖得到了较好的分离,并进行定量测定。采用夹角余弦和相关系数的方法计算菊花和野菊花指纹图谱的相似度,结果表明,菊花样品相似度的区分与实际样品分类相符合。其次,在研究糖类化合物及其品种区分的基础上,对菊花中主要黄酮类活性成分进行定性和含量研究,为菊花入药选材提供依据。运用毛细管电泳电化学检测法测定菊花中黄酮类活性成分的含量。实验选取pH9.2、浓度为50mmol/L的硼砂体系为运行缓冲液,分离电压16kV, 300μm的碳圆盘电极在0.95V(vs. SCE)下,被测五种组份柯因、黄芩苷、绿原酸、木犀草素和槲皮素得到了较好的分离,并实现了定量测定。该方法在10-4~10-6 g/mL范围内建立良好的线性关系,五标样迁移时间和峰面积RSD(n=7)分别在1.5%~3.5%, 1.9~3.6%之间,检出限(S/N=3)和平均回收率(n=3)分别在9×10-7~2.5×10-6g/mL,97.3%~104.1%之间。再次,高效液相色谱法在建立指纹图谱时具有精确性,稳定性,重现性好等优点,采用该方法,建立了12个菊花样品的指纹图谱,色谱柱为Nov-pak C18,以0.1%磷酸水溶液-甲醇体系为流动相,流速0.6mL/min,进行梯度洗脱,检测波长为254nm。运用夹角余弦和相关系数法计算菊花样品的相似度,并运用MATLAB程序对相关系数法计算结果进行聚类分析,结果与实际样品种属区分一致,为菊花的质量控制和种属的区分提供依据。最后,采用毛细管电泳电化学检测方法,研究硫酸铜—维生素C反应体系(pH7.4)中生成的羟基自由基。以对羟基苯甲酸为自由基捕捉剂,对目标产物3,4-二羟基苯甲酸进行定量测定,从而得知羟基自由基的浓度。以直径为300μm的碳圆盘电极为检测电极,工作电极电位为0.95V ( vs.SCE ),目标产物3,4-二羟基苯甲酸在1.5×10-4~6.0×10-6mol/L范围内线性关系良好,检测限1.5×10-6mol/L。并运用此方法,研究了不同品种菊花抗氧化活性。