粪肠球菌诱导的慢性根尖周炎对高脂血症大鼠主动脉炎症反应的影响

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目的:探究粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)诱导的慢性根尖周炎(Chronic Apical Periodontitis,CAP)对高脂血症大鼠全身炎症细胞因子和主动脉炎症反应的影响。方法:32只5周龄雄性SD大鼠分别经正常饮食和高脂饮食喂养12周,其中在第6周时经血脂检测确认高脂饮食喂养组高脂血症形成,此后按以下随机分组构建CAP模型或行假手术,具体分组为:正常饮食(Normal Diet,ND)组、高脂饮食(High Fat Diet,HFD)组、ND+Ef-CAP组和HFD+Ef-CAP组(N=6)。CAP组选取右侧上下颌第一二磨牙开髓封入含E.faecalis的菌棉并封闭,对照组于同一牙位行假手术但不穿透髓腔,各组建模后继续喂养12周后处死大鼠,收集上下颌骨行micro-CT扫描,心脏采血测定血清中肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1α(Interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte Chemotactic Protein-1,MCP-1)的蛋白表达水平。运用全自动生化仪检测血清中总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglycerides,TG)、高密度脂蛋白(High-Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白(Low-Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)的表达。分离大鼠主动脉组织通过苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色观察主动脉组织的病理变化,运用q RT-PCR技术检测主动脉TNF-α、MCP-1、细胞间黏附分子-1(Intercellular Adhesion Molecule-1,ICAM-1)和IL-6的mRNA表达。结果:(1)高脂饮食喂养6周后,HFD组血清中LDL-C和动脉粥样硬化指数(Atherosclerosis index,AI)较ND组显著升高(P<0.05)。开髓封入E.faecalis 12周后,ND+Ef-CAP组和HFD+Ef-CAP组的根尖周组织均可见明显的牙槽骨吸收,假手术对照的ND组和HFD组根尖周组织未见异常。(2)建模12周后,HFD组与ND组相比,血清HDL-C水平显著下降(P<0.05)。ND+Ef-CAP组与ND组相比,血清HDL-C水平显著下降(P<0.05)。HFD+Ef-CAP组与HFD组或ND+Ef-CAP组相比,血清各血脂指标未见明显差异。(3)建模12周后,HFD组与ND组相比,血清中的IL-6、TNF-α、MCP-1、IL-1β和IL-1α的浓度显著升高(P<0.05)。ND+Ef-CAP组与ND组相比,血清中IL-6浓度显著升高(P<0.05)。HFD+Ef-CAP组与ND+Ef-CAP组相比,血清中IL-6、TNF-α、IL-1α、IL-1β浓度显著升高;与HFD组相比,血清中TNF-α浓度显著升高(P<0.05)。(4)建模12周后,ND+Ef-CAP组、HFD组和HFD+Ef-CAP组皆可观察到主动脉内膜有少量炎症细胞浸润。HFD组或ND+Ef-CAP组与ND组相比,主动脉组织相关炎症因子mRNA表达皆未见显著差异。HFD+Ef-CAP组与ND组相比,主动脉组织TNF-α、MCP-1、ICAM-1的mRNA表达水平显著升高;与ND+Ef-CAP组或HFD组相比,TNF-α、MCP-1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。结论:(1)Ef-CAP感染可引起大鼠血脂指标变化,但Ef-CAP感染不足以促进高脂血症大鼠的血脂指标变化。(2)Ef-CAP感染可引起大鼠血清炎症细胞因子表达升高,且Ef-CAP感染可增强高脂血症大鼠的血清炎症因子表达,加重高脂血症大鼠的全身免疫炎症反应。(3)Ef-CAP感染增强了高脂血症大鼠的主动脉炎症反应,但本研究中的刺激强度不足以引起动脉粥样硬化斑块形成。
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