目的 按照传统的分类方法，地霉主要分为白地霉（Geotrichum candidum）、头地霉（Geotrichum capitatum） 、棒地霉（Geotrichum clavatum）。其中白地霉和头地霉最为常见。近10年来有关地霉的报道较少。本科于2002年8月在一例脓癣样地霉病的患者身上分离出一种新型地霉，经中科院微生物研究所鉴定为昔维考拉地霉（Geotrichum silvicola）。本菌在1997年新版的国家菌种目录中尚无收录，是从巴西果蝇身上分离出来的一种地霉，尚未被正式发表过，从人身上分离出本菌是国内、外首次。因此，有关昔维考拉地霉（Geotrichum silvicola）的形态学、营养生理学及其对人类的致病力国内外尚无报道，仅就其基因学方面有初步的研究。本研究从形态学、营养生理学、分子生物学等各个角度对昔维考拉地霉（Geotrichum silvicola）进行初步的研究，并通过动物试验及毛发受侵试验对其致病力进行进一步的探讨。为指导昔维考拉地霉（Geotrichum silvicola）感染的诊断与治疗提供了临床依据，具有重要的理论和现实意义。方法1真菌培养 将菌落接种于改良沙堡弱培养基上，分别放在27℃、37℃温箱中，培养3天， 然后观察菌落生长情况。直接镜检：挑取少许菌落放于载玻片上，加10%KOH并放置盖玻片，在低倍、高倍镜下仔细观察菌落形态。扫描<WP=4>电镜观察：将培养3~10天的菌落放于2.5%的戊二醛中固定，扫描电镜观察。2毛发受侵试验 将该菌分别接种于改良沙堡弱固体培养基、液体培养基中，采用3个不同年龄组的健康人的毛发，高压灭菌后置于所种菌上方。每1周观察2次，在光镜、电镜下观察毛发受侵情况。将全部数据进行统计学处理后得出结论。用SAS统计学软件组间比较的t检验及方差分析法。3动物试验 选用豚鼠60只。随机抽取30只豚鼠用环磷酰胺800mg/kg腹腔内注射，地塞米松0.5mg/只肌注,另外30只未经处理。3天后,对两组中的豚鼠的一侧背部分别用擦皮法和皮下注射法接种菌悬液（浓度为2×106CFU），另外一侧接种0.9%的生理盐水做对照组，10天后观察结果。将全部数据进行统计学处理后得出结论。各试验组计量资料用SAS统计学软件组间比较的t检验。4营养生理学 将菌落接种于改良沙氏培养基上，3天后配置菌悬液，利用法国生物梅里埃公司的API20CAUX试剂盒检测,美国德灵公司的Microscan WalkAway-40全自动微生物分析仪分析。5 DNA序列分析 对菌株26SDNAD1/D2区序列分析经正反链验证，确定了534个碱基位点，通过GenBank/EMBL/DDBJ/PDB核酸序列数据库进行同源序列检索。6温度试验 将受试菌株接种在沙堡弱固体培养基上，分别放在27℃、37℃、42℃温箱中，7天后观察生长情况。然后，将27℃温箱中的菌株放在37℃温箱中，将37℃温箱中的菌株放在27℃温箱中， 3天后再观察结果。 <WP=5>7体外药敏试验 使用天津金章医用新技术研究所提供的酵母样真菌最低抑菌浓度（MIC）药敏试剂盒。将受试菌株在用沙堡弱培养基传代纯培养，制成混悬液。用麦氏0.5号管进行比浊至相同浊度。接种后，放到35℃温箱中，孵育24h、48h观察结果。结果 1形态学 真菌培养 培养3天后均见同一菌落生长，27℃培养2-3天，长出表面平坦，中间有皱褶的，湿润的乳白色酵母样菌落，有粘性。10天后菌落变成乳黄色，表面长出绒毛。37℃培养始终为乳白色至乳黄色、湿润的酵母样菌落。挑取菌落涂片镜检可见大量矩形、桶型、椭圆型关节孢子，并可见关节孢子的一侧长出芽管。小分生孢子呈圆形，出芽或不出芽，可见厚壁孢子。扫描电镜观察：可见成链的关节孢子，呈矩形、桶型、椭圆型或圆形，关节孢子之间不相连；圆形的芽生孢子及大量菌丝。2 毛发受侵试验：2周后与菌落接触毛发的表面可见乳白色乳酪样物黏附，4周后镜检发现在毛发表面有大量关节孢子及圆形孢子。3个月后光镜下可见毛发表面有些残缺。扫描电镜示毛发被大量孢子及菌丝附着、包绕，可见菌丝穿入毛发，毛小皮有破坏现象，毛发表面凹凸不平。统计学处理后，各组差别有显著性P〈0.05。以改良沙氏固体培养基上比液体培养基感染现象出现早。27℃生长的菌落比37℃对毛发的感染时间早。年龄越小者的毛发越早被感染。3动物试验 10天后观察发现，用皮下注射法接种菌悬液的豚鼠，注射部位均有质地较硬的结节，统计学处理后，两组差别有显著性P〈0.05。其中经免疫抑制的豚鼠的结节大且出现早,未经免疫抑制的豚鼠的<WP=6>结节较小且出现晚,而对照组无结节用擦皮法接种菌悬液的豚鼠，接种处可见潮红、肿胀、渗出、结痂，而对照组无皮损。取结节做病理，苏木精-伊红染色时真皮可见慢性化脓性脓肿，其中可见圆形孢子及关节孢子和菌丝。PAS染色可见菌丝、关节孢子及圆形孢子。取经免疫抑制的豚鼠擦皮法形成的皮损做病理，PAS染色均可见角质层有大小不一的关节孢子及菌丝。取结节中的脓液直接涂片PAS染色可见菌丝及孢子。未经免疫抑制的豚鼠PAS染色均可见角质层有大小不一的关节孢子。而对照组无异常，未见菌体。4营养生理学 对照法国生物梅里埃公司的API20CAUX编码册，提示该菌属于地霉菌。其中葡萄糖 、甘油、阿拉伯糖、木糖醇均为阳性；2-酮基-葡萄糖酸盐、木糖、阿东糖醇、半乳糖、肌醇、山梨醇、( -?