【摘 要】
：
序列分析表明CadR基因是位于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)06909基因组中可有效调控镉离子ATP转运酶CadA基因表达的一段序列。该基因编码的蛋白质由147个氨基酸残基组成,
论文部分内容阅读
序列分析表明CadR基因是位于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)06909基因组中可有效调控镉离子ATP转运酶CadA基因表达的一段序列。该基因编码的蛋白质由147个氨基酸残基组成,分子量为16648Da,并含有5个半胱氨酸。通过同源序列比对发现该蛋白和MerR家族金属调控蛋白质同源,且是至今唯一发现的一种特异性调控Cd(Ⅱ)的MerR家族金属调控蛋白本论文构建了密码子优化的包含CadR基因序列的CadR-pET30a重组质粒和高效表达CadR基因的BL21菌株。经过QFF快速阴离子交换层析、MonoQ精细阴离子层析和GF凝胶排阻色谱三步纯化得到高纯度的可用于蛋白质晶体生长实验的CadR蛋白质。并且该蛋白可特异性结合Cd2+,EDTA配体竞争实验表明在pH=7.4时Cd-CadR复合物的稳定常数高达1013数量级。同时,通过DNA足迹分析和EMSA实验,确定了CadR和启动子DNA的结合区域；以上实验说明构建纯化的重组蛋白质具有良好的N端和C端活性。通过结晶条件的不断优化得到分辨率为2.1A的TC21-CadR蛋白晶体,该晶体结构表明CadR具有MerR家族蛋白质的典型特征,N端DNA结合区域具有螺旋-扭转-螺旋结构,C端Cd2+结合区域由两个单体的3个半胱氨酸组成(C77, C112’, C119’)。突变体D74GD75G-CadR的ITC实验证明在结合位点中心区域位置的两个天冬氨酸(D74、D75)与Cd2+的结合没有明显关联。
其他文献
黄土作为一种广泛分布的工程“特殊土”,常被作为工程材料应用于各种工程项目建设中。其渗透性作为重要的工程性质指标,控制着土中水分的运移,进而大大地影响着黄土的各种工程性质。由于温度的四季变化、昼夜更替,黄土的渗透性在不同的季节、不同的时间也会发生相应的改变,但国内外目前对重塑黄土渗透性随温度的变化及不同温度下黄土渗透系数的校正方法等问题还缺乏系统的研究。本文以泾阳高庄镇马兰黄土为试验研究对象,通过室
有的新闻发生时，当时只道是寻常，没多少人在意，可是那一刻，世界已经开始变得不同。谷歌本周发布了72量子比特处理器，这款处理器在调试后，计算能力有望超越传统电脑，实现计算机科学家
连体餐桌椅是大部分公共就餐场所的标准配置,然而其使用情况不容乐观。笔者在调研现有连体餐桌椅仔在的问题后,重点对人因功能和安全耐久性进行了深入探讨。通过建立功能尺寸
中国特色社会主义民生思想伴随着民众的期许与社会的进步而不断趋于成熟,中国梦从生成、提出到成为全民共识也经历了时光的积淀、自身的完善以及凝聚了人民的期待.中国梦在一
碾压混凝土拱坝普遍采用通仓薄层浇筑、大面积连续上升的施工方法,混凝土产生的大部分水化热短期内积莆在坝体无法及时散发,从而形成内外温差和层间温差,在周边基础的约束作用下坝体更易在温降时产生温度裂缝。诱导缝作为碾压混凝土拱坝的结构防裂措施,能否在坝体温度下降时率先开裂,达到释放温度应力、控制无序裂缝的目的,主要取决于缝断面的等效强度、结构形式及留设位置.鉴于目前关于诱导缝开裂机理的理论和试验研究对诱导
随着荒漠化现象的日益严重,治理荒漠化成为当务之急。所在课题组研发了牵引式固沙装备,在沙地中实现机械化铺设草方格沙障来有效治理荒漠化。针对固沙车的工作环境以及理论计
分数阶微分方程,是对整数阶微分方程的推广,通过分数阶微积分理论进行研究.由于分数阶微分方程不仅在纯数学中被公认为基本方程,而且在工程、统计力学等领域也因其多种应用而被公认为基本方程.于是,寻找其精确解成为了研究分数阶微分方程的主要的目的,为了研究一类分数阶微分方程的精确解,不少文献已提出辅助方程法、齐次平衡法等方法,本文着重选取了李对称法和不变子空间法.文章结构如下:第一章:简要说明分数阶微分方程
目的：探讨急诊使用胺碘酮治疗室性心律失常的疗效。方法：将126例快速型室性心率失常的患者随机分组，对照组给予单一的心律平治疗，实验组同时加用胺碘酮进行医治，对比两组临床效果
初中英语教学应遵循语言学习的基本规律,根据初中生的年龄特点和具体的教学内容,在课堂中有目的地引入或创设多种教学情境,使教学情境与教学内容相辅相成,从而激发学生学习兴
黄土高原长期受人类活动影响，区内自然植被大多被人工植被替代，植被景观格局时空变化复杂多样。动态监测黄土高原不同尺度下植被景观格局的时空演变，深入研究植被与地形、气候以