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益生菌的活性是衡量含有益生菌的相关产品的质量及货架期的一个重要标准。如何提高益生菌的活性以获得高活性的益生菌，一直以来都是困扰着益生菌产品生产者和科技工作者的瓶颈。本课题所选用的益生菌菌种为保加利亚乳杆菌（Lactobacillus bulgaricus，LB），为了获得高活性的益生菌，从益生菌菌体培养开始着手，通过培养基中所用的碳源、氮源和菌体生长促进因子的选择、耐热试验以及产品保藏条件等研究来为高活性益生菌产品的实现提供一定的理论依据和技术支持。首先，筛选出对LB菌体生长有很好促进作用的碳源、氮源和蔬菜浸提液，再组合培养基培养LB菌体并进行扩大培养实验。其次，选择出对LB菌体生长促进作用效果最显著的蔬菜浸提液进行成分分离、提取，再分别组合培养基培养LB菌体，选出效果最佳的蔬菜成分通过高效液相色谱（HPLC）进行鉴定。再次，将在各组添加了对LB菌体生长促进作用较好的蔬菜浸提液的培养基中培养的LB菌体分离出来，经过悬浮、造粒等处理后分别置于45℃、55℃、65℃、80℃条件下进行热处理，选出具有较好耐热能力的LB菌体。最后，将上述实验中耐热能力最好的LB菌体与脱脂乳粉混合、造粒、压片和封装，分别置于常温和4℃条件下储藏并测定LB菌体活菌数的变化。其结果有：⑴对LB菌体生长的促进效果最佳的碳和氮源分别为玉米淀粉和蛋白胨。当培养到24h时，在添加有玉米淀粉、蛋白胨的培养液中的LB菌体浓度分别达到7.5×10~8cfu/ml、2.4×10~8cfu/ml。48种蔬菜浸提液中有9种对LB菌体的生长有较好的促进作用，它们分别为小白菜、莲花白、油麦菜、山药、白萝卜、胡萝卜、小青菜、芹菜、黄瓜。当培养到24h时，各组培养液中的LB菌体的浓度分别达到9.0×10~8cfu/ml、9.1×10~8cfu/ml、8.0×10~8cfu/ml、1.2×10~9cfu/ml、1.0×10~9cfu/ml、1.4×10~9cfu/ml、8.1×10~8cfu/ml、7.1×10~8cfu/ml和2.8×10~9cfu/ml，其中添加有黄瓜浸提液的培养基中的LB活菌数的浓度最大。扩大培养过程中各组培养基中的LB菌体均能长时间保持较高的活性。⑵黄瓜所含的各组成分中脂溶性成分对LB菌体的生长起着较好的促进作用，其中，类胡萝卜素作用最为突出。当LB接种到添加有类胡萝卜素的培养基中培养到24h时，培养基中的LB菌体浓度达到1.6×10~8cfu/ml。当用高效液相色谱对类胡萝卜素的组成进行鉴定时，确定了其中含有β-类胡萝卜素。⑶将添加有小白菜、莲花白等9种蔬菜浸提液的培养基中培养出的LB菌体分离后与分别脱脂乳粉混合、造粒、封装，置于高温条件下进行处理。结果显示，添加有白萝卜浸提液的培养基中生长的LB菌体表现出最好的耐热能力；置于45℃、55℃、65℃和80℃条件下处理2h，乳粉颗粒中的LB菌体的活菌数分别为6.7×10~9cfu/g、2.3×10~9cfu/g、1.1×10~8cfu/g、5.7×10~6cfu/g。⑷将于添加白萝卜浸提液的培养基中生长的LB菌体分离出来，经过与脱脂乳粉混合造粒、压片、封装并分别置于常温和4℃条件下保藏。结果显示，不管是乳粉颗粒还是奶片最佳的保藏条件都是4℃冷藏。乳粉颗粒中的LB菌体在常温下放置到120d时活菌数则低于10~6cfu/g，而4℃冷藏的乳粉颗粒中的LB活菌数在放置到180天时活菌数为3.5×10~6cfu/g。奶片中的LB菌体在常温下放置到150d时活菌数则低于10~6cfu/g；而4℃条件下保藏的奶片中的LB菌体在放置到180d时，活菌数则依然高达5.8×10~7cfu/g。