【摘 要】
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DNA甲基化与去甲基化两个过程相互平衡,维持了基因组DNA甲基化谱式的稳定。DNA去甲基化包含主动途径和被动途径。其中,被动去甲基化主要是通过阻碍维持性DNA甲基化以及复制依赖稀释作用导致的,但是其具体的机制仍有待研究。UHRF1是一个重要的DNA甲基化的调控因子。UHRF1蛋白的SRA结构域可以结合半甲基化DNA,从而招募DNMT1完成复制过程中的DNA甲基化。如果这一过程受阻会导致DNA被动去
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DNA甲基化与去甲基化两个过程相互平衡,维持了基因组DNA甲基化谱式的稳定。DNA去甲基化包含主动途径和被动途径。其中,被动去甲基化主要是通过阻碍维持性DNA甲基化以及复制依赖稀释作用导致的,但是其具体的机制仍有待研究。UHRF1是一个重要的DNA甲基化的调控因子。UHRF1蛋白的SRA结构域可以结合半甲基化DNA,从而招募DNMT1完成复制过程中的DNA甲基化。如果这一过程受阻会导致DNA被动去甲基化。转录因子具有结合DNA的能力。假设转录因子也能与半甲基化DNA结合,它们是否会抑制UHRF1结合半甲基化DNA?为了回答这些问题,我们检测了部分转录因子与半甲基化DNA结合情况,以及转录因子与UHRF1竞争结合半甲基化DNA情况。研究表明:转录因子C-MYC、NANOG、KLF4、SP1、E2F1均可结合半甲基化的DNA。通过竞争结合DNA实验,发现C-MYC、NANOG、KLF4、SP1均可抑制UHRF1结合半甲基化DNA。同时我们通过检测转录因子与UHRF1的相互作用,发现NANOG与UHRF1存在相互作用。因此我们提出DNA被动去甲基化的一种可能的分子机制:转录因子可以通过竞争性抑制UHRF1与半甲基化DNA的结合,抑制UHRF1在半甲基化DNA上的定位,进而抑制DNA维持性甲基化。
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