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研究目的胃癌的发生发展是一个缓慢的过程,常由各种慢性萎缩性胃炎和不典型增生、异性增生、胃黏膜上皮肠化生演变而来,此过程称之为胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer, PLGC)。胃癌的发生、发展及治疗还存在不少有待解决的问题,而从肿瘤预防角度,关注PLGC的转化与逆转显得尤为重要。PLGC可激发机体自身的免疫炎症反应,激活巨噬细胞参与免疫炎症反应,释放各种促炎细胞因子如肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-a, TNF-a)、白细胞介素1β (interleukin-1, IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6, IL-6),常会造成自身炎症反应的加重,促进病理状态的恶化。胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway, CAP)是近10年来研究较为热点的神经抗炎通路,迷走神经末梢释放的乙酰胆碱(acetycholine, Ach)与巨噬细胞上的α7烟碱乙酰胆碱受体(a7nicotinic acetylcholine receptors, a7nAchRs)结合,通过一定的细胞信号转导通路,抑制巨噬细胞释放各种促炎细胞因子。本研究使用a7nAchRs激动剂N-(3R)-1-氮杂双环[2,2,2]辛-3-基-4-氯苯胺酰胺盐酸盐(N-(3R)-1-azabicyclo[2,2,2]OCT-3-YL-4-chlorobenzamide, PNU-282987)干预的方式,观察PLGC组织和血清内促炎因子的变化,以及PLGC组织的组织学特性。探讨胆碱能抗炎通路(CAP)对胃癌癌前病变(PLGC)炎症反应的调节作用。研究方法52只4周雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠(体重100-120g)被纳入研究。本研究主要采用的PLGC的病理模型制作是给予大鼠饮用致癌剂N-甲基-N’-亚硝基-N-硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)配成的水溶剂,待其自由饮用28周成模。本研究主要分为4组,即正常对照组(使用饮用水喂养+腹腔注射生理盐水),阴性对照组(使用MNNG的水溶剂喂养+腹腔注射生理盐水)、PNU低剂量组(使用MNNG+PNU每次2.4mg/kg)、PNU高剂量组(使用MNNG+PNU每次24mg/kg)。 PNU采用腹腔注射的方式,3天1次,连续注射5次。大鼠在麻醉状态下处死,取胃及血液做相应指标观察。对胃黏膜常规病理切片,使用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, Elisa)和实时定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)分别测定血清和PLGC组织内TNF-α, IL-1β, IL-6.研究结果待至成模日,每组随机抽取3只大鼠处死,分离PLGC相关病变组织,采用常规病例切片观察发现成功地复制出大鼠PLGC模型。正常组大鼠饮食如常,身体健壮,体重自然增加；PLGC模型的大鼠均表现为精神萎靡,消瘦,摄食量下降；而采用a7nAchRs激动剂PNU-282987干预之后,两组不同剂量的大鼠均呈现为精神略有振奋,摄食量较阴性对照组略有上升。经过a7nAchRs激动剂PNU-282987腹腔注射治疗后,发现大鼠PLGC相关病变组织的常规病理切片发现,造模各组胃黏膜组织不典型增生发病率均为100%,但阴性对照组和PNU-282987高剂量组主要表现为中、重度异性增生。PNU-282987低剂量组却以轻、中度不典型增生为主。采用Elisa方式检测血清内各促炎细胞因子TNF-a, IL-1β, IL-6的浓度,经过MNNG造模的三组,其促炎细胞因子的血清含量均明显大于正常对照组。较之于阴性对照组,PNU-282987低剂量组显著降低了这些物质的浓度,但是PNU-282987高剂量组却未能降低促炎细胞因子的浓度。采用RT-PCR方式检测PLGC胃黏膜组织内mRNATNF-a、mRNAIL-1β、 mRNAIL-6的水平,采用MNNG造模的三组TNF-a、IL-1β、IL-6的表达均明显高于正常对照组。较之阴性对照组,PNU-282987低剂量组可以显著降低胃黏膜组织内TNF-α、IL-1p、 IL-6的水平,但是PNU-282987高剂量组却增加了胃黏膜组织内TNF-α、IL-1p、 IL-6的水平。研究结论采用低剂量a7nAchRs激动剂PNU-282987腹腔注射治疗大鼠PLGC后,胃粘膜不典型增生主要表现为轻中度不典型增生,且可以增强抗炎效果,而高剂量PNU-282987治疗后,胃粘膜不典型增生主要表现为中重度不典型增生,且增加了促炎因子的产生,可见药物剂量的使用是发挥CAP抗炎通路功效较为重要的一个环节。