索拉菲尼、PDTC联用对胰腺癌细胞株PANC-1的作用研究

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目的:探讨多分子靶向药物索拉菲尼(sorafenib)联用PDTC对体外人胰腺癌细胞株PANC-1的细胞增殖、细胞周期的影响;以及其对细胞质和细胞核中NF-kB表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:取对数生长期人胰腺癌细胞株PANC-1细胞用于实验。试验组分索拉菲尼单药物、PDTC单药组及联合药物组,其中设空白对照组,空白对照组为未加药的培养液。以MTT法检测各药物组对胰腺癌细胞株PANC-1细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测各组药物对细胞周期的影响;免疫细胞化学方法观察各药物组NF-κB在细胞质和细胞核中表达水平的变化。结果:1.MTT法检测结果显示:索拉菲尼和PDTC均能抑制胰腺癌细胞株PANC-1的增殖,且均随药物浓度的增加作用也增强,呈剂量—时间双效应关系(P<0.05);并分别计算出作用48h单药组细胞的半数抑制浓度(IC50)值索拉菲尼为14.102μmol/L、PDTC为105.717μmol/L,浓度值均较高,说明索拉菲尼和PDTC单药组对PANC-1缺乏有效抑制;而低浓度索拉菲尼(3μmol/L)和低浓度PDTC(25μmol/L)联合应用较单用索拉菲尼(3μmol/L)和PDTC(25μmol/L),能显著提高细胞生长抑制率(P<0.05)。2.流式细胞仪法检测结果显示:与空白对照组相比,索拉菲尼(3μmol/L)、PDTC(25μmol/L)、索拉菲尼(3μmol/L)+PDTC(25μmol/L)处理48h后PANC-1细胞的G0/G1期百分比升高,分别为(50.93±3.51,48.07±1.70,74.07±2.40)%,而空白对照组G0/G1期细胞比例(37.97±1.21)%;S期细胞数相应的减少,分别为(37.30±1.70,38.17±0.51)%,而空白对照组S期细胞比例为(45.33±2.03)%,差别同样有统计学意义(P<0.05);说明索拉菲尼、PDTC及索拉菲尼+PDTC联合药物组细胞发生G0/G1期停滞(P<0.05),且索拉菲尼+PDTC联合药物组统计学最为显著意义。3.免疫组化法检测结果显示:NF-κB在对照组中胰腺癌PANC-1细胞胞浆和胞核中均有表达,索拉菲尼诱导48h后NF-κB在胰腺癌PANC-1细胞核内表达明显增强。然而,当用PDTC联合索拉菲尼诱导48h后,胰腺癌PANC-1细胞核中NF-κB的表达明显减弱。结论:索拉菲尼和PDTC在体外对PANC-1细胞增殖均具有抑制作用,但IC50值均较高。PDTC和索拉菲尼联合应用较单用索拉菲尼,能明显提高胰腺癌细胞株PANC-1细胞的生长抑制率和并使细胞发生G0/G1期停滞。索拉菲尼能够诱导NF-κB的活化,而PDTC恰能抑制NF-κB的活化。因此,PDTC可以增强PANC-1细胞对索拉菲尼的敏感性。
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