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刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)是一种具有较强木质素降解能力的白腐真菌，隶属于真菌门、担子菌亚门、真担子菌纲、层菌亚纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属。木质素降解酶是参与木质素生物降解过程中的酶类，具有高氧化降解能力和多底物性，能够降解木质素、多环芳烃类化合物、杂环类化合物和合成染料等多种难降解有机物。本文对Pleurotus eryngii-Co007木质素降解酶的产酶条件进行优化、并对其酶学性质和染料降解效果开展系统研究，为今后将其应用于环境保护、生物漂白与制浆、食品工业等领域提供理论和实践依据。
通过初始pH、秸秆、吐温-80和铜离子的单因素实验和中心组合响应面优化考察了影响Pleurotus eryngii-C0007菌株产木质素降解酶的因素，得到液态发酵产木质素降解酶的最佳条件。在此基础上，开展3L上罐参数优化，结果表明在25℃，150r/min,0.8vvm溶氧的条件下，培养10天，发酵液中酶活最高达到691.04U/mL，较摇瓶培养提高了1.86倍。同时对Pleurotus eryngii-C0007菌丝体的再次利用产木质素降解酶进行了研究，在pH5.8的缓冲体系，菌丝体产酶效果最好，能再利用两次。菌丝体在三次利用的缓冲液体系，酶活最高可达到565.04U/mL。
为了提高割胶纯化的回收率，分析了超声处理对Native-PAGE中活性目标蛋白回收的影响。根据单因素实验结果，采用响应面分析法的Central Composite进行实验设计，得到的最佳超声条件为超声时间188.40min、超声功率76.31W。在此条件下，Native-PAGE中活性目标蛋白回收率达40.03％，与回归模型的预测值相对误差仅1.11％，回归方程与实际情况拟合较好。
对Pleurotus eryngii-C0007木质素降解酶粗酶及单一组分芳基乙醇酶AAO-Pec0007的酶学性质进行了考察。以ABTS为底物，刺芹侧耳木质素降解酶粗酶的酶学性质如下：最适催化pH为3.0，在pH为4.0时稳定性最好，残余酶活高达91.8％；最适催化温度为15℃，最适稳定温度为10℃；Zn2+、Mn2+、Fe3+、Cu2+对粗酶的催化有一定的促进作用，Mn2+的促进作用最大；K+、Ca2+、Ag+、Na+、Fe2+、Mg2+对粗酶的催化有一定的抑制，Fe2+的抑制最强；氧化ABTS的动力学参数Vmax和Km分别为714.29U/mg和1.5mM。以VA为底物，AAO-Pec0007的酶学性质如下：最适催化pH为6.0，在pH为7.4时稳定性最好，残余酶活高达93％;最适催化温度为70℃，最适稳定温度为20℃；测试金属离子没有促进作用，其中的Zn2+、Fe2+、Cu2+这三种金属离子对AAO-Peco007酶活力有明显抑制作用；氧化VA的动力学参数Vmax和Km分别为80U/mg和0.921mM。
采用Pleurotus eryngii-C0007木质素降解酶粗酶对四种不同类型的染料进行脱色试验，结果表明溴酚蓝＞刚果红＞靛蓝＞亚甲基蓝。对脱色影响因素进行研究，以2h染料脱色体系为例，在脱色温度30℃、pH4.0、H2O25μmol/L、粗酶浓度20U/mL、溴酚蓝浓度10mg/L的条件下，溴酚蓝脱色效率最高，脱色率为89.56％，小分子介体物质ABTS对溴酚蓝脱色体系脱色率无促进；在脱色温度30℃、pH4.6、H2O210μmol/L、ABTS2.5μmol/L、粗酶浓度20U/mL、靛蓝浓度100mg/L的条件下，靛蓝脱色效率最高，脱色率为50.47％;在脱色温度40℃、pH4.8、H2O22.5μmol/L、ABTS2.5μmol/L、粗酶浓度20U/mL、刚果红浓度100mg/L的条件下，刚果红脱色效率最高，脱色率为54.72％;对亚甲基蓝染液的脱色率在24h时达到10.12％。
采用AAO.Peco007单一组分对四种不同染料进行脱色试验，结果表明刚果红＞溴酚蓝＞靛蓝＞亚甲基蓝(亚甲基蓝不分解)。对脱色影响因素进行研究：以2h染料脱色体系为例，在脱色温度40℃、pH4.2、H2O210μmol/L、AAO. Pec0007浓度20U/mL、溴酚蓝浓度10mg/L的条件下，溴酚蓝脱色效率最高，脱色率为25.69％，小分子介体物质ABTS对溴酚蓝脱色体系脱色率无促进；在脱色温度30℃、pH4.2、H2O210μmol/L、ABTS2.5μmol/L、AAO-Pec0007浓度20U/mL、靛蓝浓度100mg/L的条件下，靛蓝脱色效率最高，脱色率为24.57％;在脱色温度40℃、pH5.2、H2O22.5μmol/L、ABTS2.5μmol/L、AAO-Peco007浓度20U/mL、刚果红浓度100mg/L的条件下，刚果红脱色效率最高，脱色率为48.31％。
在上述基础上，采用Box-Behnken试验的响应面法进一步优化Pleurotus eryngii-C0007木质素降解酶粗酶对蒽醌类染料靛蓝和偶氮类染料刚果红脱色条件，结果表明在pH4.60、30℃、ABTS2.85μmol/L的条件下，木质素降解酶粗酶对靛蓝的的脱色率为49.98％;在pH4.81、40.15℃、ABTS2.96μmol/L的条件下，木质素降解酶粗酶对刚果红的脱色率为53.93％。