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目的:探讨补阳还五汤在改善脓毒症大鼠脾脏免疫功能中的作用,为中西医结合治疗脓毒症提供依据和线索。方法:选用健康雄性Wistar大鼠180只,按随机数字表法分为假手术组、模型组、补阳还五汤(Buyanghuanwutang,BYHWT)治疗组和BYHWT防治组。每组动物按处死时点不同(6、12、24、48、96小时)再各分为5小组。采用盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)复制脓毒症大鼠模型。BYHWT治疗组动物造模后每日给予补阳还五汤灌服,BYHWT防治组动物术前3天即开始每日给予补阳还五汤灌服。各小组动物相应时点经腹腔静脉取血后活杀动物取脾脏。采用内毒素检测仪检测各组动物各时点血清内毒素水平,采用HE染色光学显微镜观察各组实验动物脾脏形态学改变,采用免疫组化法检测各组动物各时点脾脏CD3~+T、CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞及B淋巴细胞的水平,TUNEL法检测各组大鼠各时点脾脏细胞凋亡的情况。应用image pro plus 6.0图像分析系统进行图像采集及分析。结果:CLP术后大鼠的脾脏在光镜下观察可见白髓逐渐萎缩,淋巴小结破坏,这种表现的严重程度为模型组＞BYHWT治疗组＞BYHWT防治组。TUNEL染色发现凋亡细胞首先出现于脾小体,随后动脉周围淋巴鞘亦可见。CLP术后,模型组、BYHWT治疗组、BYHWT防治组大鼠各时点血清内毒素水平均较假手术组明显增高(p＜0.01);术后24小时开始,BYHWT治疗组血清内毒素水平即显著低于模型组(p＜0.01);术后12小时开始,BYHWT防治组血清内毒素水平即显著低于模型组(p＜0.01);术后24小时开始,BYHWT防治组血清内毒素水平即低于BYHWT治疗组(p＜0.05)。CLP术后6小时开始,模型组、BYHWT治疗组、BYHWT防治组大鼠脾脏CD3~+T、CD4~+T淋巴细胞以及B淋巴细胞水平均较假手术组明显降低(p＜0.01),而各组CD8~+T淋巴细胞与假手术组比较,始终无明显变化(p＞0.05);CLP术后24小时开始,BYHWT治疗组大鼠脾脏CD3~+T、CD4~+T淋巴细胞以及B淋巴细胞水平均显著高于模型组(p＜0.01);CLP术后6惺笨?BYHWT防治组大鼠脾脏CD3~+T、CD4~+T淋巴细胞以及B淋巴细胞水平均高于模型组(p＜0.01或p＜0.05);术后6小时开始,BYHWT防治组大鼠脾脏CD3~+T、CD4~+T淋巴细胞以及B淋巴细胞水平均高于BYHWT治疗组(p＜0.01或p＜0.05)。CLP术后,模型组、BYHWT治疗组、BYHWT防治组大鼠各时点脾细胞凋亡均较假手术组明显增高(p＜0.01);术后6小时开始,BYHWT治疗组和BYHWT防治组的脾细胞凋亡水平即显著低于模型组(p＜0.01);术后6小时开始,BYHWT防治组脾细胞凋亡水平即低于BYHWT治疗组(p＜0.05)。结论:1、脓毒症大鼠血清内毒素水平明显增高、脾脏CD3~+T、CD4~+T淋巴细胞和B淋巴细胞数目减少,脾脏细胞凋亡显著增加;2、补阳还五汤能有效降低脓毒症大鼠血清内毒素水平,减少脾脏细胞凋亡,提高脾脏CD3~+T、CD4~+T淋巴细胞和B淋巴细胞数目;3、对脓毒症大鼠的治疗效果,补阳还五汤预防性用药优于单纯治疗性用药。