共轭亚油酸(Conjugated Linoleic Acid,CLA)是一种人体自身无法合成但是具有重要的保健作用和营养价值的一种脂肪酸,近年来利用实验动物对其生理功能做了广泛的研究,包括抗肿瘤、减肥、提高免疫力等生理功能。CLA也是非常有应用前景的饲料添加剂,能够增加动物肌肉组织,减少脂肪含量；生产富含CLA的动物产品如牛奶、禽蛋等；提高动物免疫力,减少抗生素的使用。自然界存在的共轭亚油酸只在反刍动物肉、奶、及其制品中找到,且含量有限。化学生产方法产物不单一,而且混有副产物。因此本实验希望通过生物方法得到一种生物酶,可以在适宜的条件下催化富含亚油酸的红花籽油得到共轭亚油酸,为大规模生产CLA用于饲料添加剂提供基础。本研究共分为以下三个部分：共轭亚油酸检测方法建立。一是分光光度计法,利用共轭亚油酸的共轭双键在233nm下有吸收值,而亚油酸没有；另一种是气相色谱(气质联用)法,根据脂肪酸链的长度和不饱和度进行分离。菌株的构建和发酵条件探索；通过查找蛋白晶体结构,找到了一种来源于痤疮丙酸杆菌的可以生产单一共轭亚油酸(trans-10,cis-12 CLA)的亚油酸异构酶,酶基因由上海捷瑞公司合成,选用大肠杆菌作为转化子,通过构建载体和转化体,获得了一种可以生产单一结构的共轭亚油酸的大肠杆菌。通过亚油酸异构酶的发酵条件研究,确定了发酵底物浓度为1%o LA和1‰辅酶FAD。最适反应温度在40℃左右,pH6.7左右,在此条件下亚油酸异构酶保持最高的活性；双酶联用催化体系的建立和细胞的固定化：以红花籽油作为底物,8种候选脂肪酶与实验二获得的亚油酸异构酶建立双酶联用体系,以共轭亚油酸产率为选择指标,选出2种理想的脂肪酶用于后续反应。通过固定化表达亚油酸异构酶重组细胞,固定化细胞的重复次数达到9次以上,共轭亚油酸的产率达到39%以上,产物的纯度达到99%以上,该技术具有工业应用的前景。