目的:EBLN2是被发现的人类内源性非逆转录病毒元件,在人类和其他哺乳动物中广泛存在。有研究发现EBLN2在宿主细胞内已经进化为新功能的基因,然而,该基因在肝癌中的作用仍不清晰。我们在人肝癌样本中检测到EBLN2下调,这预示着EBLN2在肝癌发生与发展中具有一定作用。本课题则基于细胞水平的体外实验探究EBLN2基因在肝癌发生发展中的作用。方法:本实验运用实时定量RT-PCR技术和蛋白印迹技术评价EBLN2基因在肝癌细胞系和人肝癌样本中的表达水平;构建EBLN2基因真核表达质粒和CRISPR/Cas9基因敲除质粒;观察EBLN2基因过表达或通过CRISPR/Cas9系统敲除后对肝癌细胞株的增殖、平板克隆形成能力及非依赖性增殖能力的影响;观察EBLN2过表达对肝癌细胞株细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:实验结果表明EBLN2基因于癌旁样本相比在肝组织中下调,且在肝癌细胞系中表达较低;EBLN2基因过表达后抑制肝癌细胞株YY-8103和Focus的增殖、平板克隆形成和非依赖性增殖能力;EBLN2基因敲除后促进肝癌细胞株Hep G2和Huh-7的增殖、平板克隆形成和非依赖性增殖能力;EBLN2基因过表达后抑制细胞从G1期进入S期;EBLN2基因敲除后对细胞凋亡无影响。结论:EBLN2基因在肝癌组织中表达水平明显下调,且通过调节细胞周期抑制肝癌细胞增殖。