荞麦壳中活性物质对体内外糖脂代谢影响研究

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本实验主要包括三大部分,首先,采用超声波双频提取法对荞麦壳进行提取,利用一系列化学实验方法(如总酚含量的测定,黄酮含量的测定,DPPH·自由基的清除能力等)测定荞麦壳提取物的抗氧化能力等,同时使用高效液相色谱法(HPLC)对荞麦壳提取物中富含的黄酮多酚类物质进行定性定量分析。结果显示,荞麦壳中总酚黄酮含量很高,分别达到4.359mg/g,3.096mg/g,HPLC定量分析结果显示芦丁含量高达3.055mg/g,其对于DPPH ·和ABTS ·的清除能力分别达到72.85%和46.86%。其次,采用体内实验的方法,以Wistar大鼠为研究对象,对其注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)以建立Ⅱ型糖尿病实验鼠模型,考察荞麦壳提取物对糖尿病大鼠的血糖、血脂及氧化应激指标的影响,并且对实验糖尿病大鼠肝脏中糖脂代谢相关基因进行实时荧光定量PCR实验,对相关机理进行探讨。结果表明:荞麦壳提取物自由进食干预可在一定程度上降低MDA的含量,提高T-AOC含量,抗糖尿病引起的氧化应激损伤,降低TC、TG等含量,进一步改善脂代谢水平,且与正常组、糖尿病组比较,干预组能显著改善糖脂代谢及氧化应激相关基因mRNA的相对表达量,干预组中与糖原合成有关的基因(GS2、GYG1)表达上调,与糖异生途径有关的基因(PEPC、G6PC1)表达下调,与脂肪合成有关的基因(ACC、FAS、SREBP1)表达下调。通过该研究发现荞麦壳提取物可有效降低糖尿病大鼠的血糖,并有效改善脂代谢紊乱,提高抗氧化应激的能力,这极大的提高了荞麦壳的利用率,并为寻求一种较好的减缓糖尿病症状的有效饮食干预提供了新的思路。最后,通过体外实验(细胞实验)进一步探究了荞麦壳提取物对于脂代谢的作用机理,以C3H10T1/2-Clone8为研究对象,对其进行成脂诱导分化,并对细胞中与脂代谢相关的基因进行实时荧光定量PCR实验。结果显示,与成脂化诱导细胞相比,荞麦壳提取物干预能显著降低了与脂肪合成相关基因mRNA的表达量,这为荞麦壳改善机体内糖脂代谢紊乱提供了进一步的理论依据。
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