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目的: 内源性硫化氢(H2S)作为新近发现的气体信号分子，在心血管系统领域中发挥着广泛独特的生理、病理生理学效应。其心肌保护作用近年来受到高度的关注，已有研究表明硫化氧供体一硫氢化钠(NaHS)预处理可以减少离体心脏缺血再灌注损伤。但NaHS后处理在心肌保护中的研究尚未见报道，本研究旨在探讨NaHS后处理对原代培养的新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用，并观察其对心肌细胞线粒体通透性转换的影响。
方法: 培养原代新生大鼠心肌细胞，建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型(缺氧2h，复氧2h)和NaHS后处理模型。分为4组：对照组(Normal)、缺氧/复氧组(H/R)、缺氧后处理组(HPC)、硫氢化钠后处理组(H/R+NaHS)。在缺氧前、缺氧2h、复氧0.5h、复氧1h、复氧2h，5个时间点检测如下指标：①心肌细胞存活率；②乳酸脱氢酶(LDH)活性；③丙二醛(MDA)含量：④超氧化物歧化酶(SOD)活性；⑤MTT法检测细胞活力；⑥应用荧光指示剂酯化钙黄绿素(Calcein AM)在激光共聚焦显微镜下检测线粒体通透性转换孔(MPTP)的开放程度；⑦应用荧光指示剂四甲基罗丹明乙酯(TMRE)在激光共聚焦显微镜下检测线粒体内膜电位(△ψm)。通过以上检测指标，观察NaHS后处理对培养的新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用，和心肌细胞线粒体通透性转换和内膜电位的影响。
结果:
第一部分：经缺氧后处理和NaHS后处理后，HPC组细胞存活率(70.5±2.2％)和H/R+NaHS组细胞存活率(66.2±2.5％)比H/R组(61.3±1.8％)显著升高(P<0.05)；HPC组LDH活性(36.2±1.3 U·L-1)和H/R+NaHS组LDH活性(39.5±1.5 U·L-1)显著低于H/R组(44.6±1.7 U·L-1)(P<0.05)：HPC组MDA含量(0.905±0.033 mmol·g-1Pro)和H/R+NaHS组MDA含量(0.986±0.042mmol·g-1Pro)明显低于H/R组(1.120±0.045 mmol·g-1Pro)(P<0.05)：HPC组SOD活性(16.9±1.0 U·L-1)和H/R+NaHS组SOD活性(15.9±1.2 U·L-1)明显高于H/R组(13.3±1.5 U·L-1)(P<0.05)。在随后各个复氧期时间点，HPC组和H/R+NaHS组细胞存活率和SOD活性依旧明显高于H/R组，而LDH活性和MDA含量显著低于H/R组(P<0.05)。
第二部分：缺氧2h内细胞活力显著下降，MPTP开放，△ψm下降。在复氧初期两组细胞损伤会进一步加剧，但H/R+NaHS组在NaHS后处理后，细胞活力(45±3.7％)下降幅度明显小于H/R组(36.5±1.8％)(P<0.05)；MPTP荧光强度(52±5.7％)明显高于H/R组(40±5.4％)(P<0.05)；△ψm荧光强度(47.2±5.1％)也明显高于H/R组(33.4±5.0％)(P<0.05)。到复氧2h时与复氧1h比较，两组细胞损伤均不再加重，但H/R+NaHS组各项指标仍然明显好于H/R组(P<0.05)。
结论:
1、硫氢化钠后处理可以有效减轻缺氧/复氧造成的心肌细胞损伤，促进损伤后心肌细胞的存活。
2、硫氢化钠后处理心肌保护作用与增加缺氧/复氧心肌细胞氧自由基的清除有关。
3、硫氢化钠后处理可以有效阻止MPTP开放，抑制△ψm下降，减轻缺氧/复氧心肌细胞线粒体通透性转换的发生，从而减轻缺氧/复氧造成的心肌细胞损伤。