藏药“俄色叶”的质量标准研究

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“俄色叶”为甘孜州藏族自治州藏族民间习用药材,来源于蔷薇科苹果属植物变叶海棠Malus toringoides(Rehd.)Hughes和花叶海棠Malus transitoria (Batal.) Schneid的干燥叶。始载于《晶镜本草》,具有保肝利胆、除腻涤滞、攻坚化积的作用,常用于治疗消化不良、脘腹胀痛、肝疾,在该地区使用历史悠久,但目前缺乏法定标准,且化学成分、有效性均不明确。本文首次通过化学成分与功效相关性的研究,明确指标性成分,进而系统研究其质量标准,主要研究结果如下:1.化学成分与功效相关性的研究在前期提取分离基础上,从花叶海棠中分离得到根皮素、槲皮素、根皮苷,通过HPLC法测定其纯度,均在98%以上,达到对照品要求。首次通过DPPH法对俄色叶及原植物的果实、花进行抗氧化活性研究,花、叶、果实均具有一定的抗氧化活性,叶与花的抗氧化活性相近,明显高于果实。结合化学成分的含量及抗氧化活性,根皮素、根皮苷在叶中抗氧化活的贡献率分别为9.51%、2.88%,而槲皮素几乎无,因此前两者适宜作为俄色叶的含量测定的指标性成分,评价俄色叶药材质量。首次对俄色叶及化学成分进行保肝实验研究,不同剂量的变叶海棠、花叶海棠、根皮素、根皮苷对CCl4引起的小鼠急性肝损伤均具有很好保护作用。除MDA水平外,在ALT、AST、 SOD水平方面,变叶海棠、花叶海棠均比赶黄草佳,根皮素和根皮苷均比联苯双酯佳。变叶海棠和花叶海棠均以高剂量(2g/kg)最佳,而根皮素以中剂量(10mg/kg)最佳,根皮苷以低剂量(5mg/kg)最佳。根据药材的有效剂量,确定俄色叶的每日给药量为3.3-13.2g,这与本草中记载基本相符,根皮素和根皮苷为俄色叶的有效成分。2.质量标准研究在上述基础上,对22批俄色叶的基原、性状、显微、薄层色谱、检查、浸出物、含量测定进行研究。建立了以氯仿-甲醇-甲酸(8:2:0.1)为展开剂,以根皮素对照品为对照,进行薄层色谱鉴别方法,其斑点清晰、Rf值适中、重现性良好;建立了以根皮苷为对照,以甲醇为提取溶剂,采用紫外-可见分光光度法直接测定总黄酮含量方法;建立了以40%乙醇为提取溶剂,采用HPLC法测定根皮素含量方法,其色谱条件稳定。同时进行安全性评价研究,俄色叶的半数致死量均大于15g/kg,属无毒物质。通过以上研究,俄色叶的叶与叶芽在性状、显微及含量测定方面差异大,对二者进行了分别规定。为制定出系统、科学的俄色叶的质量标准奠定基础,为保证藏区俄色叶的食用和药用的安全、有效提供科学依据。
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