木糖醇作为一种具有特殊功能的新型食品添加剂,在食品工业中用途越来越广泛。萃取法生产木糖醇很不经济;目前主要以化学合成法生产,该法技术成熟,但耗能多,反应条件要求高,分离纯化困难,所以导致木糖醇成本较高,限制了它的使用范围;利用微生物细胞转化法生产木糖醇可克服化学方法的缺点,生产过程反应温和,不需要高温高压;工艺简单,容易控制;特别得益于微生物酶的专一性,目的产物单一,分离纯化容易,操作费用低,这些特点都可以有效地降低成本。本论文初步研究了酵母细胞转化木糖生产木糖醇的工艺和高产菌株的选育,目的是提高木糖转化率和木糖醇生成速率,为以后的工业生产奠定基础。首先,利用薄层层析法初步筛选出一株转化木糖能力较高的酵母菌株,通过单因素试验,确定酵母细胞培养基的最佳碳、氮源及其浓度,研究了不同金属盐对酵母细胞生长及其转化木糖能力的影响。初定培养基的成分(10g/L 木糖、10g/L 葡萄糖作为碳源、1g/L 酵母粉、2g/L 蛋白胨为氮源、1g/L 磷酸二氢钾)后,利用响应面分析法优化木糖、葡萄糖和蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾之间的最佳配比,最后,通过研究酵母细胞培养条件对其生长及其转化木糖能力的影响,选定培养酵母细胞的最佳接种量为10%,250mL 摇瓶装液量为40mL,摇床转速为200rpm,初始pH 值为6。通过对酵母细胞转化木糖条件优化,确定了酵母细胞的最佳培养时间为12h,250mL摇瓶装液量为60mL,摇床转速为200rpm。通过对不同的分批补料方式研究,表明在较低的底物浓度条件下,渗透压低,酵母细胞中木糖还原酶可以保持较高的活力,木糖醇的生成速率及木糖转化率能得到进一步的提高。通过海藻酸钠将游离的酵母细胞进行固定化,固定化后的酵母细胞与游离的酵母细胞转化木糖能力相当,并重复利用固定化的酵母细胞分批转化木糖产木糖醇试验,共进行了5 次,转化木糖能力基本稳定。最后通过对出发菌株进行紫外线诱变和NTG 诱变处理,选育高产菌株。高产菌转化木糖能力比出发菌提高近20%,而且遗传性较稳定。