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研究背景:尿道下裂作为最常见的小儿泌尿生殖系统先天性畸形之一,病因不清。随着尿道下裂病因学的深入研究,发现多个基因参与尿道下裂的发生。部分合并尿道下裂相关畸形综合征病人中的HoxA13基因存在突变,HoxA13基因敲除小鼠出现尿道口异位、肛门至尿道口距离(AGD)变短等尿道下裂样畸形表现,甚至其泌尿生殖窦缺失,为此我们推测HoxA13与尿道下裂的发生有关。目的:研究尿道下裂患儿包皮及邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)诱导的尿道下裂小鼠阴茎组织中HoxA13的基因及其蛋白表达,初步探讨其与尿道下裂发生的相关性。方法:实验分为人体试验和动物实验两部分。⑴人体试验:我们选取25例尿道下裂及15例包茎患儿为研究对象,手术中取其包皮组织,采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学方法分别检测HoxA13的mRNA及蛋白表达水平。⑵动物实验:选用清洁级C57BL/6小鼠,经交配确认怀孕后,孕鼠随机分为2组:玉米油对照组、DEHP500mg/kg/d剂量组,各组在孕期12d至17d持续经口灌注给药。于GD19时行破宫产取出仔鼠,测量各组雄鼠体重、AGD;统计各组胎鼠尿道下裂发生率及观测阴茎组织病理学变化;应用常规RT-PCR及免疫组织化学方法分别检测诱导出的尿道下裂胎鼠及正常对照胎鼠阴茎组织中HoxA13的mRNA及蛋白表达水平。结果:⑴人体试验:实时荧光定量PCR结果:对照组HoxA13 mRNA表达量为52.827±35.733、尿道下裂组HoxA13 mRNA表达量为9.468±6.549,差异具有显著性;免疫组化结果:HoxA13蛋白定位表达于皮肤表皮层,尿道下裂组呈阴性～阳性,正常对照组呈阳性～强阳性,正常对照组HoxA13蛋白表达量明显高于尿道下裂组。⑵动物实验:AGD及尿道下裂发生率:对照组、DEHP500剂量组的AGD及尿道下裂发生率分别为0.208±0.01cm、0.181±0.12cm (P<0.01);0%、75.7%(P<0.01)。胎鼠阴茎病理学结果:DEHP500组胎鼠尿道板及包皮于阴茎腹侧隆起融合落后,DEHP500组尿道与腹侧皮肤间的皮下组织明显减少。DEHP500剂量诱导的尿道下裂胎鼠阴茎组织中HoxA13 mRNA表达水平较对照组明显降低;HoxA13蛋白表达于皮肤表皮层,在尿道下裂胎鼠中呈阴性～阳性,对照组胎鼠呈阳性～强阳性。结论:人体标本研究发现尿道下裂患儿包皮中HoxA13基因mRNA及蛋白表达较正常儿童明显降低,提示HoxA13基因与尿道下裂关系密切;DEHP能导致外生殖器发育异常,并影响胎鼠的生长发育及体重。DEHP诱导的尿道下裂胎鼠阴茎中HoxA13基因及蛋白均较对照组降低,与人体标本研究结果一致,同样提示HoxA13基因异常表达可能与尿道下裂发生相关,其异常表达可能影响胚胎期尿道发育。