落叶松-杨栅锈菌(Melampsora larici-populina Kleb. )又称青杨叶锈病,广泛分布于世界各杨树栽植区,可危害青杨派,黑杨派及其杂交杨,甚至胡杨等多种杨树,是杨树锈病中分布最广,危害最大的一种病害。该菌种内分化明显,遗传背景复杂。欧洲、北美曾报道过该菌的5个生理小种,我国也相继发现该菌生理小种分化现象。但是,以往的研究上没有找到该病原物的特异性分子标记。鉴于此,本研究主要从以下几个方面进行研究,以期在中国落叶松-杨栅锈菌特异性分子标记研究方面有所突破。(1)确立优化的RAPD扩增体系。众所周知,RAPD用于病原物DNA分子生物学标记时,有其自身的缺点——不稳定,易受环境条件影响,甚至不同的实验室、实验人做出的结构都有可能大相径庭,这些缺点为RAPD研究结果的交流带来极大不便,几近不能用于交流。本试验本着优化RAPD体系,使RAPD试验结果便于交流的原则,仔细、逐个的优化RAPD反映体系中的各个因素,最终确定了一个比较合适的RAPD反应体系。(2)寻找特异的分子标记。在中国落叶松-杨栅锈菌的研究方面,中国的学者作了大量的研究,但是涉及落叶松-杨栅锈菌特异性分子标记的研究比较少。本试验在大量的筛选随机引物的基础上,利用优化的RAPD体系筛选出中国落叶松-杨栅锈菌1号、3号、4号、5号生理小种的特异性RAPD标记。(3)建立中国落叶松-杨栅锈菌1号、4号、5号生理小种的SCAR标记。本试验对寻找到的特异性RAPD标记做了进一步转化,试图建立中国落叶松-杨栅锈菌的SCAR标记。经过试验,成功获得1号、4号、5号生理小种的SCAR标记。这为中国落叶松-杨栅锈菌的生理小种快速鉴定,流行种群监测以及检测提供了更为有效的方法