DDR1通过调控SLC1A5和mTORC1信号通路促进肝细胞癌进展

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lu_bright_zhang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:肝细胞癌(HCC)预后较差,死亡率高,是目前全世界发生率位居前列的癌症之一。因此,进一步研究和理解肝细胞癌进展的分子机制可以为我们治疗和管理肝细胞癌提供重要视角。受体酪氨酸激酶(RTK)在各种癌症的发生和发展中起着不俗的作用,盘状蛋白结构域受体1(DDR1)是一种与常见RTK相比拥有特殊之处的跨膜RTK。该研究试图去进行一系列实验去理解DDR1作为RTK在HCC发生发展中发挥的作用,以及DDR1发挥作用的机制。方法:使用蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测了肝癌细胞系和原发性肝癌病人样本里DDR1的蛋白水平;根据DDR1在各细胞系中的表达量对其进行了过表达和敲减以检测DDR1对肿瘤增殖的影响。使用CCK8和克隆形成实验探索DDR1对肿瘤增殖的影响,使用流式检测细胞周期。在机制上,通过液相色谱质谱联用(LC-MS)发现与DDR1相结合的蛋白。为了探索DDR1是如何影响SLC1A5的稳定性,使用了一种蛋白合成抑制剂(CHX)预处理过表达或敲减DDR1的肝癌细胞系。同时使用了蛋白酶体抑制剂(Mg132)和溶酶体抑制剂(NH4Cl)预处理细胞进而检测属于何种调控方式。也通过蛋白质印迹法和免疫组化检测了SLC1A5在肝细胞癌病人样本中的表达量。结果:通过蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法发现DDR1的表达在HCC中明显增加,并且与不良的临床预后存在相关。另外,DDR1无论是在体内还是体外,均能影响HCC肿瘤细胞的增殖速度,此外,还发现DDR1表达的缺失或增加会影响HCC细胞周期进程。并且,DDR1是通过溶酶体蛋白降解途径来影响的SLC1A5稳定性的。组化和蛋白印迹实验证明DDR1和SLC1A5是存在蛋白表达量之间的相关性的。结论:研究揭示了DDR1发挥肝癌促进作用以及全新的机制:(1)DDR1表达可以作为肝细胞癌独立的预后标志物,DDR1和SLC1A5的蛋白表达水平在临床样本中呈现正相关;(2)DDR1主要是通过上调SLC1A5来发挥促进mTORC1信号通路激活的功能的;(3)DDR1通过调控SLC1A5蛋白的溶酶体降解途径来调控其稳定性。研究结果为理解HCC的发展提供了新的视角,并提供了HCC治疗和管理的新思路。
其他文献
研究背景及目的:我国为乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染高流行区,约有2000~3000万慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者,由HBV感染所致的肝硬化和原发性肝癌占比高达77%和84%,给患者家庭和经济社会发展带来了沉重的负担。慢性乙型肝炎的治疗一直是临床热点、难点问题。HBV表面抗原(Hepatitis B surface antige
学位
目的:大量研究数据表明嵌合抗原受体T细胞(Chimeric antigen receptor-T,CAR-T)功能障碍与治疗后无应答或缓解后复发密切相关,因此,研究导致CAR-T细胞功能不佳的机制对改善其疗效尤为重要。CAR-T细胞在体内受到肿瘤微环境中众多因子的调控作用,其中肿瘤细胞分泌的细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是介导肿瘤细胞和免疫细胞间对话的关键媒介。
学位
【目的】探究NLRP3/白细胞介素1β(IL-1β)信号通路在异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病(a GVHD)中的作用及其可能的机制。【方法】首先通过酶联免疫吸附试验检测接受异基因造血干细胞移植患者外周血血浆中IL-1β及IL-18的浓度,并评估不同浓度水平下患者的总体生存和无事件生存时间的差异。其次通过构建小鼠a GVHD模型,明确NLRP3及其下游分子在预处理早期和移植后在急性移植物抗
学位
1.慢性HBV感染儿童抗病毒治疗筛选评分效能评价目的:在儿童慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者中验证TREAT-B评分系统筛选可能需要抗病毒治疗患者的诊断效能,分析其在不同年龄段儿童患者的适用性,并检验该评分应用于儿童慢性HBV感染者的可靠性。方法:回顾性收集华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科2018年3月至2021年8月门诊就诊及住院部收治的尚未接受抗病毒治
学位
我国老龄化程度加剧,养老资源投入不足,失能、半失能人群的照料问题日益严峻。一方面,随着传统家庭照料功能的减退以及家庭规模的缩减,失能老人的照料问题给家庭成员造成了巨大的压力;另一方面,老龄化程度的加剧,失能人员数量的增加,给社会医疗机构和养老体系带来了资源围堵。为了更好地解决社会老龄化问题以及失能人员的照料问题,二十大报告再次明确提出建立长期护理保险制度。实施长期护理保险制度,为失能人员的照料问题
学位
目的:三阴性乳腺癌(TNBC)约占乳腺癌的15%,易转移、预后差。膜蛋白Nectin-4在包括TNBC在内的多种肿瘤中过表达。我们的研究旨在用99m Tc标记的抗Nectin-4单克隆抗体(m AbNectin-4)构建核素分子影像探针,并通过SPECT/CT显像研究乳腺癌显像和Nectin-4在体评估的可行性。方法:高表达Nectin-4的乳腺癌细胞系MDA-MB-468(TNBC细胞系)和低表
学位
【目的】靶向治疗与免疫治疗相结合的策略为癌症治疗提供了良好的前景。WEE1激酶是细胞周期中调控G2/M检查点的关键分子。最近的研究表明,WEE1抑制剂在肿瘤治疗方面具有非常大的潜力,但其对免疫反应的影响以及联合免疫治疗的有效性仍不清楚。因此,本研究旨在探索WEE1抑制剂对免疫反应的影响及机制,评估其联合免疫治疗的有效性,并探讨其在抗肿瘤治疗中的潜在应用价值。【方法】在本研究中,根据数据库分析和细胞
学位
目的:探讨口腔种植体-基台微间隙充填对种植修复系统及周围骨力学的影响。方法 :建立第一磨牙缺失的下颌骨有限元模型,模拟植入1颗Straumann种植体。建立对不同大小种植体-基台微间隙(5、6、7、8、9μm)胶质充填后的种植系统模型,于 面垂直向加载100 N咬合力和斜向45°加载100 N咬合力,分析种植体系统各部件及下颌骨的等效应力。结果:不论种植体-基台微间隙充填与否,修复体整体和基台的受
期刊
目的:软骨损伤是一种常见的医学问题,可以由创伤、老化、软骨本身和软骨下骨的紊乱(包括骨关节炎、骨坏死和剥脱性骨软骨炎)等引起。关节软骨损伤时可导致慢性疼痛,引起受累关节功能障碍,严重降低患者的生活质量。然而,由于软骨血管缺血,软骨细胞代谢活性低,软骨缺损的自愈能力有限。虽然软骨缺损的治疗有多种选择,但由于再生组织的质量较差,透明软骨的完全修复在临床实践中仍然是一个主要的挑战。安全、无创的磁场治疗结
学位
第一部分:老年供肾(≥65岁)的临床应用与中长期移植效果分析目的:探讨65岁及以上老年供肾施行单肾移植的临床应用及中长期移植效果。方法:筛选2013年1月至2016年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院实施的接受供者年龄在65岁及以上的公民逝世后器官捐献单肾移植受者(老年供肾组,43例),采用数字随机法1:1选取同期接受供者年龄在18~49岁且受者年龄、性别与老年供肾组匹配的标准供肾移植受者作
学位