阿片类药物是临床上治疗中、重度疼痛的主要药物,通过与不同类型阿片受体结合,参与疼痛调节进而发挥强效镇痛作用。除了产生镇痛作用之外,阿片类药物还可诱导外周和中枢神经系统伤害性感受通路敏化,发生阿片类药物痛觉过敏,极大地限制了其在临床中的应用。瑞芬太尼导致的痛觉过敏研究广泛,但芬太尼所致痛觉过敏尚未明确,阐明芬太尼痛觉过敏作用机制有助于实施有效的治疗措施。有研究证明,环氧合酶抑制剂对阿片类药物痛敏具有预防作用,课题组已有临床研究证实,氟比洛芬酯作为一种非选择性COX抑制剂,可缓解瑞芬太尼引起的术后痛觉过敏,间接表明COX在伤害感受信号中发挥重要作用。同时,PGD₂作为COX的主要产物之一,近来被发现在多种疾病模型中具有抗炎作用,上游存在H-PGDS和L-PGD两种PGD₂合成酶,下游存在DP1和DP2两个PGD₂受体,且研究发现其下游受体DP1在神经保护中起到关键作用。本研究拟探讨芬太尼诱发小鼠术后痛觉过敏的情况以及COXs—PGDS—PGD₂—DP1通路在芬太尼诱发术后痛敏中的作用机制。目的:检测COXs—PGDS—PGD₂—DP1通路在芬太尼诱发术后痛敏小鼠脊髓中的表达情况,评价其作用。方法一:雄性C57BL/6J小鼠（64只）,6～8周龄,体重约20～25g,采用随机数字表法分为8组:C、I组尾静脉注射生理盐水0.1ml,注射4次,间隔15min;F、IF(50μg·kg^-1)组尾静脉注射芬太尼12.5μg·kg^-1,0.1ml,注射4次,间隔15分钟;IF(40μg·kg^-1)、IF(60μg·kg^-1)、IF(80μg·kg^-1)、IF(100μg·kg^-1)组分别尾静脉注射芬太尼10μg·kg^-1、15μg·kg^-1、20μg·kg^-1、25μg·kg^-1,0.1ml,注射4次,间隔15min。于第1次注射芬太尼后15 min建立切口痛模型,于注射前1d、最后一次注射后3h、6h、1d、2d、3d、5d、7d时测定缩足反应阈（PWT）和甩尾反应潜伏期（TWL）。其中C组和IF(50μg·kg^-1)组7d测试结束后将小鼠麻醉处死,取腰段脊髓备用。方法二:将40只雄性小鼠分为5组:6h、1d、2d、3d、5d组,均行芬太尼(50μg·kg^-1)切口痛模型制备,分别于最后一次注射后6h、1d、2d、3d、5d时将小鼠麻醉处死,采集腰段脊髓,应用ELISA法测量PGE₂和PGD₂蛋白含量,RT-PCR法测量H-PGDS、L-PGDS、DP1、DP2 m RNA含量,应用免疫荧光染色,对小鼠脊髓COX-1和COX-2含量及分布进行分析。方法三:将80只雄性小鼠分为10组:C、IF+媒介物、IF+BW245C(8μg·10μl^-1)、IF+BW245C(80μg·10μl^-1)、I+BW245C(80μg·10μl^-1)、F+BW245C(80μg·10μl^-1)、IF+BWA868C(4μg·10μl^-1)、IF+BWA868C(40μg·10μl^-1)、I+BWA868C(40μg·10μl^-1)、F+BWA868C(40μg·10μl^-1)组。芬太尼切口痛模型制备完成后1h分别鞘内注射相应剂量DMSO、BW245C、BWA868C。于尾静脉注射前1d、最后一次注射后3h、6h、1d、2d、3d、5d、7d时测定PWT和TWL。结果一:小鼠静脉注射前1d,各组PWT、TWL之间无统计学差异（P>0.05）;与C组比较,I、F、IF组PWT、TWL降低,均于注射后2d时降低最显著（P<0.05）;与I组和F组比较,IF组PWT、TWL显著降低（P<0.05）,但I组与F组无差异（P>0.05）;与造模前1d比较,各组TWL各时点均显著降低（P<0.05）,I、F、IF组PWT于1d、2d、3d时显著降低（P<0.05）。小鼠注射芬太尼剂量增高,PWT、TWL结果降低显著（P<0.05）。结果二:芬太尼注射后2d,IF组小鼠脊髓背角COX-1和COX-2含量明显增高,且COX-1和COX-2均与神经元细胞共定位。与造模前1d比较,PGE₂于1d～3d时增高（P<0.05）,PGD₂于1d～7d时明显增高,且5d、7d时增高最显著（P<0.05）;L-PGDS m RNA各时点无差异（P>0.05）,H-PGDS m RNA于5d时增高最显著（P<0.05）;DP1 m RNA于5d、7d时明显增高（P<0.05）,DP2 m RNA各时点无差异（P>0.05）。结果三:与IF组比较,IF+媒介物组PWT、TWL未见差异（P>0.05）,IF+BW245C(8μg·10μl^-1)组、IF+BW245C(80μg·10μl^-1)组PWT、TWL结果显著增高且激动剂高剂量组比低剂量组增高效果显著（P<0.05）;与I组和F组比较,I+BW245C(80μg·10μl^-1)组和F+BW245C(80μg·10μl^-1)组PWT、TWL明显增高（P<0.05）。与IF组比较,IF+媒介物组PWT、TWL未见差异（P>0.05）,IF+BWA868C(4μg·10μl^-1)组、IF+BWA868C(40μg·10μl^-1)组PWT、TWL结果显著降低且抑制剂高剂量组比低剂量组降低效果显著（P<0.05）;与I组和F组比较,I+BWA868C(40μg·10μl^-1)组和F+BWA868C(40μg·10μl^-1)组PWT、TWL明显降低（P<0.05）。结论:芬太尼引发小鼠术后机械和热痛觉过敏,且具有剂量依赖性。脊髓COXs—H-PGDS—PGD₂—DP1通路可能参与芬太尼所致痛觉过敏后的痛阈回升机制。激动DP1受体可缓解芬太尼引发的小鼠痛觉过敏,抑制DP1受体可加重芬太尼引发的小鼠痛觉过敏,且均具有剂量依赖性。