化学缺氧对肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞的影响

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氧气是生命之源,氧气参与调节体内的生命活动,包括组织修复、细胞呼吸、胚胎发育、激素合成以及细胞因子的生成;由于机体各组织器官储氧量不同,缺氧对各器官组织受损害的程度也不同。缺氧会导致人体各个组织器官功能代谢紊乱,加速了机体的衰老,甚至会引起糖尿病、中风、癌症等,严重危害人类健康。肿瘤是处于在低于正常氧分压的微环境中的细胞群体,肿瘤所处微环境是一个非常复杂的系统,肿瘤的转移是肿瘤细胞与其所处的微环境相互作用,共同进化的结果。肿瘤微环境由细胞外基质、可溶性因子、基质细胞等构成,大多数肿瘤的微环境表现为低的pH值、低氧分压,缺氧环境会诱导缺氧诱导因子的高表达,促使肿瘤细胞的生长、浸润和转移。研究发现肿瘤组织的缺氧微环境使肿瘤细胞对放射线的治疗敏感性大大降低,对化疗的药物耐药性大大提高,给临床肿瘤的放、化学治疗带来了难度,所以在肿瘤治疗中针对肿瘤组织微环境的低氧状态的研究称为近几年的重点之一。体外研究缺氧的方法有物理缺氧法和化学缺氧法。物理缺氧法需要庞大的辅助设备,例如氮气罐;化学缺氧法常用试剂是氯化钴和硫代硫酸钠以及氰化物,钴离子是一种重金属,对细胞有潜在的致癌作用;硫代硫酸钠,其造成的缺氧伴随着放热,又有副产物二氧化硫(SO2)的产生;氰化物抑制细胞内的线粒体呼吸作用酶的活性,使整个电子传递链不能进行,导致细胞不能进行有氧呼吸,从而使细胞缺氧。本研究用一种新型的对组织或细胞无毒或低毒的化学缺氧试剂亚硫酸钠来模拟肿瘤周围低氧微环境,来研究缺氧对肿瘤细胞的影响。首先确定了本实验用化学缺氧试剂亚硫酸钠所形成的缺氧浓度及维持缺氧的时间,并评估了亚硫酸钠缺氧后的产物硫酸钠对癌细胞的影响,筛选出了合适的亚硫酸钠浓度用于后续的缺氧实验;本研究模拟实体瘤低氧微环境,系统的研究了缺氧下癌细胞的增殖、活力、形态(面积、周长、横纵比)以及细胞骨架变化。对实体瘤缺氧微环境的研究可以进一步揭示癌细胞的的生长特性,更好的揭示癌细胞的浸润、转移以及对对放、化疗的抵抗性机制,为肿瘤的治疗提供新的思路。
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