背景肝细胞癌（HCC）是世界上最常见、最具侵袭性的消化道肿瘤。由于HCC具有起病隐匿、发展迅速、易转移等特点,整体治疗效果不尽人意[1]。因此,探讨肿瘤发生、增殖和转移的潜在机制已成为抗肿瘤研究的热点之一。肝癌细胞增殖迅速,形成局部缺氧微环境,在此环境中肿瘤糖酵解的代谢模式可以提高细胞对缺氧缺血的耐受性,促进肿瘤细胞的侵袭和转移[2]。已糖激酶Ⅱ（HK2）是催化糖酵解第一步的关键酶,使线粒体中ATP生成与葡萄糖磷酸化结合起来,与癌细胞生长、存活和转移有关。已发现HK2在肝细胞癌中的表达与肿瘤分级、分期以及肝癌死亡率升高和耐药性有关[3]。楝酰胺（Rocaglamide,简称Roc-A）是一类从米仔兰植物属中提取的抗肿瘤物质,可通过真核翻译起始因子4A（e IF4A）作用于RNA序列间特定的双分子腔来发挥作用[4]。Roc-A还可通过抑制热休克因子（HSF1）表达,使硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）表达增加引起葡萄糖摄取减少来抑制糖酵解;还通过激活MAPK p38和JNK信号通路及抑制Ras-CRaf-MEK-ERK信号通路诱导细胞凋亡[5]。Roc-A可通过多种通路抑制肿瘤的发生发展,但其是否通过抑制HK2表达,促进肝癌细胞的凋亡?目前相关机制的研究较少。目的通过观察Roc-A对人肝癌细胞系Hep G2（Hep G2细胞）凋亡情况的影响,旨在探讨其可能的作用机制。方法1.加入不同浓度Roc-A培养的Hep G2细胞凋亡情况观察:取对数生长期Hep G2细胞,分为5组,分别加入0（空白对照）、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时取各组细胞,采用YF488-Annexin V/PI荧光双染法观察细胞凋亡情况。2.加入不同浓度Roc-A培养的Hep G2细胞已糖激酶Ⅱ（HK2）、抑凋亡因子类似物（BCL2L1）m RNA检测:取对数生长期Hep G2细胞,分为2组,分别加入0、100 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用RT-q PCR法检测细胞HK2、BCL2L1 m RNA。3.加入不同浓度Roc-A培养的Hep G2细胞HK2、BCL2L1蛋白检测:（1）取适量Hep G2细胞,分为3组,分别加入0、100、200 nmol/L的Roc-A,培养24 h采用蛋白组学质谱分析法检测细胞HK2、BCL2L1蛋白。（2）取对数生长期Hep G2细胞分为5组,分别加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用Western Blotting法检测HK2、BCL2L1蛋白。4.癌组织HK2表达与肝癌患者的生存时间关系分析:采用Kaplan Meier Plotter癌症数据库分析癌组织HK2表达与肝癌患者生存时间的关系。结果1.加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液Hep G2的细胞凋亡率分别为0.83%±0.21%、9.46%±2.34%、24.68%±4.22%、39.60%±2.16%及58.63%±1.62%,组间两两比较,F=8807,Р﹤0.05。在本实验中,随着Roc-A溶液浓度的增加,细胞凋亡率也随之增加。2.与空白对照比较,培养24 h时加入100 nmol/L Roc-A溶液的Hep G2细胞HK2、BCL2L1 m RNA相对表达量均降低（Р均﹤0.05）。3.与空白对照比较,加入不同浓度Roc-A培养Hep G2细胞HK2、BCL2L1蛋白相对表量均降低（P均﹤0.05）。4.与癌组织HK2高表达的肝癌患者比较,HK2低表达的肝癌患者的生存时间更长（Р﹤0.05）。结论1.Roc-A促进Hep G2细胞的凋亡,并且细胞凋亡与Roc-A浓度呈正相关。2.Roc-A促Hep G2细胞凋亡的机制可能为Roc-A抑制Hep G2细胞HK2、BCL2L1 m RNA及蛋白的表达。