以半夏[Pinellia ternata（Thunb.）Breit.]叶柄为外植体诱导产生愈伤组织,将愈伤组织多次继代培养获得适宜悬浮培养的疏松愈伤组织,利用疏松愈伤组织进行悬浮培养,通过单因素试验筛选对半夏游离块茎分化有效的植物激素种类后,再采用正交试验优化游离块茎分化的条件。同时,分析游离块茎分化过程中果胶、纤维素和半纤维素的含量变化,并观察其组织结构变化;利用SSR分子标记确认游离块茎是否发生体细胞无性系变异。主要结果如下:1、以半夏叶柄为外植体诱导产生的愈伤组织为材料进行继代培养,采用正交试验设计探究蔗糖、2,4-D和6-BA浓度对愈伤组织增殖的影响。结果表明:半夏愈伤组织继代的适宜培养基为MS+2,4-D 2.0 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1,利用该培养基连续继代培养3～4次后,形成大量淡黄、易碎的适于悬浮培养的疏松愈伤组织。2、以半夏疏松愈伤组织为材料进行液体悬浮培养,采用单因素试验探究不同细胞分裂素类（6-BA、KT、ZT、TDZ）和生长素类（2,4-D、NAA、IAA、IBA）对其游离块茎分化的影响。结果表明:适于半夏游离块茎分化的细胞分裂素是6-BA,生长素是IBA。以单因素试验为基础设计正交试验,探究蔗糖、6-BA和IBA浓度对半夏游离块茎分化的影响。结果表明:半夏游离块茎分化的适宜培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1+蔗糖20 g·L-1,疏松愈伤组织以此培养基连续继代4～5次后获得半夏游离块茎。3、以半夏疏松愈伤组织为材料,MS+6-BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1为基本培养基,采用单因素试验探究不同理化因子对半夏游离块茎分化的影响。结果表明:在悬浮培养中适于半夏游离块茎分化的摇床转速为90 r·min-1、培养温度为25℃、光照强度为2000 lx、光周期为12 h·d-1、p H为5.8、继代培养周期为15 d、装液量为25m L、接种量为1.0 g。4、以半夏疏松愈伤组织为材料,提取和测定游离块茎分化过程中与细胞壁形成有关的果胶、纤维素和半纤维素含量的变化,并进行石蜡切片观察其显微结构的变化过程。结果表明:悬浮培养过程中细胞团逐渐变大,颜色逐渐变绿、变深;果胶、纤维素和半纤维素含量都随着游离块茎的分化有着不同程度的增加;组织显微结构中观察到拟分生组织。5、分别以半夏植株和悬浮培养得到的游离块茎为材料,采用SSR分子标记探究培养过程中是否发生体细胞无性系变异。结果表明:DNA片段从带型和谱带强弱、数目等方面均与母株DNA一致,初步判断其未发生体细胞无性系变异（DNA水平上未发生变异）,其遗传物质稳定。