论文部分内容阅读
目的：通过氧化损伤标记物8-羟基脱氧鸟苷（8-OHDG）及细胞凋亡标记物半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的检测，分析心肌缺血缺氧、心肌缺血再灌注、心肌细胞氧化应激的病理变化及相关机制，在此基础上研究氧化樟脑对氧化应激损伤后心肌细胞的保护作用。方法：采用H9c2大鼠心肌细胞复制缺氧模型，随机分为4组：正常组、氧化应激组、氧化应激+氧化樟脑A组、氧化应激+氧化樟脑B组。正常对照组：不作任何特殊处理；氧化应激组：将心肌细胞更换为无氧培养液，放入缺氧装置内，继续培养4h后，更换复氧液，再进行有氧培养4h，完成缺氧/复氧模型；氧化应激+氧化樟脑组：在心肌细胞缺氧/复氧完成后分别加入10ul/50ml（A组）、20ul/50ml（B组）浓度的氧化樟脑继续培养6h。通过噻唑蓝微量自动比色法（MTT）检测各组心肌细胞活力。通过免疫化学染色观察各组细胞氧化损伤标记物8-羟基脱氧鸟苷（8-OHDG）及细胞凋亡标记物半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）水平。统计学处理以Sigma Stat3.5软件进行统计学处理，应用t-Test或one-wayANOVA分析，结果以Mean±SD表示，P<0.05为有统计学差异。结果：1.氧化应激组H9c2心肌细胞继续培养6h后进行MTT检测。结果表明：氧化应激组吸光度值（A值）低于对照组（P<0.05）。2.氧化应激+氧化樟脑组H9c2心肌细胞继续培养6h后进行MTT检测。结果表明：氧化应激组吸光度值（A值）低于氧化应激+氧化樟脑组，氧化应激+氧化樟脑组吸光度值（A值）低于对照组（P<0.05），氧化应激+氧化樟脑组较氧化应激组心肌细胞活力明显升高。氧化应激+氧化樟脑B组心肌细胞活力高于氧化应激+氧化樟脑A组。3.8-OhdG表达在对照组最低，氧化应激组最高，而氧化应激+氧化樟脑组较氧化应激组明显降低，氧化应激+氧化樟脑B组8-OhdG表达低于氧化应激+氧化樟脑A组。4. caspase-3的蛋白表达在对照组最低，氧化应激组最高，而氧化应激+氧化樟脑组较氧化应激组明显降低，氧化应激+氧化樟脑B组的caspase-3蛋白表达低于氧化应激+氧化樟脑A组。结论：氧化樟脑对氧化应激损伤后心肌细胞具有保护作用，它可减轻氧化应激后心肌细胞的损伤，抑制氧化应激后心肌细胞的凋亡。