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本试验采用单一因素试验和正交试验,研究了有机溶剂法提取玉米胚中黄酮类化合物的方法,并选用大孔树脂对提取物进行纯化。试验结果表明:当乙醇浓度80%,提取时间2h,料液比1:12,提取温度为80℃时,提取率较高,提取率为2.46%。在精制过程中,对不同极性的D-101,AB-8,NKA-9大孔树脂进行筛选,结果表明,AB-8的精制效果好。因此本试验采用AB-8大孔树脂对总黄酮进行精制。
通过有机溶剂对黄酮类化合物的提取,证明了使用玉米胚为原料是可行的。为了进一步提高黄酮类化合物的产率,尝试使用α-淀粉酶进行糖苷转移,提高提取效果,同时对α-淀粉酶的固定化进行研究。对固定化的研究结果表明:以壳聚糖为载体,用4%戊二醛进行交联,加酶量为3mg/mL条件下可以获得最佳的固定化效果;与游离酶相比,制备的固定化酶催化反应的最适温度由50℃升高到60℃,最适pH由5.6下降到4.8,其适宜作用温度范围、pH值范围均比游离酶范围宽;固定化酶的热稳定性优于游离酶,且具有良好的操作稳定性。另外对三种提取效果进行比较,发现使用游离酶法、固定化酶法都较有机溶剂法提取效果好,黄酮得率分别为2.82%、2.63%、2.46%。
最后,采用紫外吸收光谱,红外光谱及质谱方法,对精提液进行结构分析,分析结果:精提液含有7-羟基黄酮。