银翘散治疗急性病毒性咽炎的临床和基础研究

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目的:1.利用病毒分离培养及荧光定量PCR方法检测分析急性咽炎患者不同呼吸道标本(鼻拭子、咽拭子及鼻灌洗)的病毒病原体,初步揭示急性咽炎的病毒感染谱;同时也比较不同呼吸道采样方法在成人急性咽炎病毒检测中的敏感性及检出效果,为临床有效的开展采样提供重要而实用的参考。2.观察中药经典方银翘散治疗急性病毒性咽炎的临床疗效,进一步以甲型流感病毒鼠小鼠模型评价其对流感病毒的体内抑制作用,从临床和动物实验两方面共同评价银翘散治疗急性咽炎致病原—流感病毒的疗效。方法:1.急性咽炎患者的呼吸道病毒病原体检测:入组标准:符合急性咽炎诊断标准及中医急喉痹诊断标准者;年龄在18-65岁之间,性别不限;急性起病,病程在3天内。入组的急性咽炎患者顺次采集咽拭子、鼻咽拭子及鼻灌洗标本,分别应用病毒分离培养(7种)及荧光定量PCR(15种)检测多种呼吸道病毒。其中,分离培养检测病原种类包括甲型流感(Flu A)、乙型流感(Flu B).副流感1-3型(PIV1~PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV);荧光定量PCR检测病原种类包括Flu A、FluB、PIV1、PIV2、PIV3、PIV4、RSV、ADV.鼻病毒(RHV)、肠道病毒(EV)、人冠状病毒(HCoV-229E、OC43、NL63、HKUl).偏肺病毒(HMPV)。2.银翘散治疗急性病毒性咽炎的临床疗效观察:入组标准同上,另外必须为符合病毒学检测确诊的急性病毒性咽炎患者。入组患者按意愿分为银翘散治疗组及对照组,利用自拟症状量表作疗效观察。3.银翘散体内抗甲型流感药效:以甲型流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染NIH小鼠,制作病毒性肺炎模型,观察银翘散提取物治疗组和对照组的生存状态及检测肺指数,以苏木素-伊红染色(HE染色)法观察病理改变。结果:1.在检测的115个患者的345份样本中,病毒培养法检测的阳性标本合计22份,总病毒分离阳性率为6.38%;各种病毒的分离检出数从高至低依次为:甲型流感病毒>乙型流感病毒>呼吸道合胞病毒>腺病毒和副流感病毒;阳性标本中的病毒原体比例,流感病毒检出率最高,其他呼吸道病毒依次为:PIV、ADV、RSV。荧光定量PCR法检测的阳性标本数合计97份,总阳性率为28.12%。2.检出的病毒种类,以较为敏感的分子检测方法计,按检出率高低分别为普通冠状病毒>流感病毒>鼻病毒>腺病毒>副流感病毒>肠道病毒>呼吸道合胞病毒>偏肺病毒。3.两种病毒检测方法都显示,不同呼吸道标本类型的检出数从高至低依次为,鼻咽拭子>咽拭子>鼻灌洗液。4.共纳入115例急性咽炎患者,采样的平均时间点为发病后2.5±1.0天。共有80例患者(70%,80/115)经病毒检测证实至少有一种病毒感染。样本任意病毒检出率方面鼻咽拭子为81.25%(65/80、咽拭子为60%(48/80)、鼻灌洗为47.5%(38/80)。鼻咽拭子任意病毒检出率明显高于咽拭子(P<0.01)及鼻灌洗(P<0.01)。在所有的病毒检测中,鼻咽拭子的敏感性分别高于鼻灌洗(74%[95%CI=66-83] vs.45%[95%CI=35-55], P<0.01)与咽拭子(74%[95%CI=66-83] vs.48%[95%CI=39-59], P<0.01)。5.银翘散疗效观察临床研究共纳入病例80例,其中银翘散组60例,对照组20例,银翘散组比对照组在症状改善方面作用更加显著。治疗3天后银翘散组在咽痛、咽异物感、咽粘膜及悬雍垂红肿、咽侧索红肿症状体征改善方面明显优于对照组(P<0.05)。治疗6天后银翘散组与对照组相比,对咽痛、咽粘膜及悬雍垂红肿、咽后壁淋巴滤泡症状有明显的改善(P<0.05)。6.银翘散体内抗流感病毒实验结果显示,银翘散总提物(300mg/kg/d)可以一定程度减轻小鼠感染流感病毒引起的体重减轻等全身症状,降低因发生病毒性肺炎升高的肺指数,改善鼠肺间质性肺炎的病变,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在成人急性咽炎患者中,多种呼吸道病毒都是重要的致病原,其中冠状病毒、鼻病毒和流感病毒是主要病原体,临床诊疗时应予更多的重视。对于这类患者选择合适的采样方法是提高检出率的关键,应首选性价比高的鼻咽拭子进行病毒检测。银翘散对急性病毒性咽炎的临床疗效显著,对可引起急性病毒性咽炎重要病原体之一的流感病毒是一种有效的治疗药物。综合临床床和基础研究的结果,银翘散对于急性病毒性咽炎(尤其是流感病毒引起)的临床治疗具有很大应用潜力和可行性。
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