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目的:探讨体外培养兔舌黏膜上皮细胞的生物学特性。采用羊膜为载体培养兔舌黏膜上皮细胞。
探讨兔舌黏膜上皮细胞以羊膜为载体构建组织工程化角膜上皮的可行性。
方法:消化法培养兔舌黏膜上皮细胞,通过倒置相差显微镜、免疫细胞化学法分析兔舌黏膜上皮细胞的生长特性。兔舌黏膜上皮细胞种植于去上皮羊膜上进行培养扩增,将培养获得的上皮细胞进行HE 染色、免疫组织化学鉴定和透射电镜观察。
结果:体外培养的舌黏膜细胞呈上皮细胞的典型形态,角蛋白免疫组化染色阳性。经过2-3周培养,兔舌黏膜上皮细胞可在去上皮羊膜上增殖形成复合上皮。HE 染色显示该复合上皮由2-3 层细胞组成。免疫组织化学显示细胞角蛋白表达阳性。透射电镜观察显示细胞间可见桥粒连接,基底层细胞与去上皮羊膜之间有半桥粒连接。
结论:初步研究显示兔舌黏膜上皮细胞以去上皮羊膜为载体构建的复层上皮细胞类似于兔角膜上皮,构建复合上皮的方法有待进一步改进以期获得更接近正常角膜上皮的组织工程化角膜上皮。