苜蓿总黄酮制备工艺及其药效学研究

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苜蓿为豆科(Leguminosae)紫花苜蓿(Medicago. sativca. Linn)的全草,为药食两用的植物,苜蓿中含有多种天然的有效成分,具有较好的药用价值,本文以紫花苜蓿为原料,针对其中的活性成分对总黄酮类化合物进行提取、富集、纯化进一步对其药理活性进行研究,为开发治疗痔疮的药物奠定基础。本文首先采用分光光度法建立了紫花苜蓿总黄酮含量测定的方法,进一步优化了苜蓿总黄酮的提取工艺,并采用大孔树脂吸附的方法优化了富集工艺。优化苜蓿总黄酮的提取工艺,方法是采用均匀设计法分别对影响总黄酮提取的因素进行了优化。最佳提取工艺为固液比为1:19,提取2次,提取时间128min,乙醇浓度71%。苜蓿总黄酮的富集工艺优化结果:选择D101树脂,上样量1:20,使用3Bv用量的70%的乙醇作为洗脱剂进行洗脱,洗脱流速为2ml/0.79cm2.min。本文对紫花苜蓿总黄酮进行了药效学研究,为了评价紫花苜蓿总黄酮治疗痔疮的效果,从抗炎、镇痛、抗溃疡、体外抑菌和抗出血、促凝血几个方面进行了药效学实验,结果表明,紫花苜蓿总黄酮对二甲苯引起的小鼠耳肿胀与鸡蛋清所致的小鼠足趾肿胀和琼脂肉芽肿等炎症有明显改善作用;物理镇痛(热板法)、化学镇痛(醋酸扭体)法均显示该药有镇痛作用;采用打孔法、试管二倍稀释法的体外抑菌试验,显示紫花苜蓿总黄酮对大肠杆菌、金色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色葡萄球菌有不同程度的抑制作用;抗出血和促凝血研究证明紫花苜蓿总黄酮可使小鼠的出血时间和凝血时间明显缩短,证明其具有促进止血和凝血作用;同时可使醋酸引起的小鼠肛门渗出液减少,溃疡面积缩小,溃疡愈合时间缩短。紫花苜蓿总黄酮提取物具有价廉易得、给药方便、副作用小等优点所以是治疗痔疮的理想药物,有较好应用前景。
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