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本文主要从家蚕提取物对MIN6细胞存活率影响、对小鼠胰岛功能的保护作用及改善胰岛素抵抗作用三个方面进行研究,探讨了家蚕提取物对胰岛β细胞的作用及对胰岛素信号与炎症信号通路的影响,揭示其对糖尿病的作用机制,明确降糖的有效成分,为临床中抗糖尿病新药的开发奠定研究基础。采用冻干技术将活体家蚕制成家蚕冻干粉后,经由正丁醇和70%乙醇溶液提取,得到正丁醇部位(Silkwormn-butyl alcohol,SB)和 70%乙醇部位(Silkworm ethanol,SA)以0.4mol·L-1H2O2培养MIN6细胞,制备细胞损伤模型,MTT法检测家蚕提取物对MIN6细胞存活率的影响。与空白对照组比,家蚕提取物能增加正常MIN6细胞存活率(P<0.05);与模型组比,家蚕提取物能增加H202诱导的MIN6细胞存活率(P<0.05),表明家蚕提取物具有增强正常MIN6细胞的活性,促进细胞增殖,对H202诱导的MIN6细胞损伤有保护作用,且呈剂量依赖性。以15 mg·100g-1剂量腹腔注射STZ溶液,制备1型糖尿病小鼠模型,取成模小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和SA低、中、高剂量组(10只/组);空白对照组和模型组小鼠按0.1 mL·1Og-1剂量给予纯化水,其他给药组给予相应药物,连续给药14 d;自由进食、饮水。每天观察各组小鼠饮水量、尿量、毛色及精神状态,每周监测小鼠体重;测定造模前、给药后第7、14 d的空腹血糖;14 d后,摘除眼球取血,ELISA法检测家蚕提取物对糖尿病小鼠血清胰岛素的影响,并取小鼠胰腺,采用HE染色法观察小鼠胰腺的病理学变化。与模型组比,家蚕提取物可降低糖尿病小鼠血糖(P<0.05),增加血清胰岛素含量(P<0.01);HE染色结果显示,家蚕提取物组小鼠胰岛细胞排列整齐、边界清晰、萎缩程度明显好转。表明家蚕提取物能降低1型糖尿病小鼠血糖,增加血清胰岛素含量,对小鼠胰岛功能具有保护作用。3T3-L1前脂肪细胞诱导成脂肪细胞,并用油红O染色法鉴定;将3T3-L1脂肪细胞分为模型组和对照组,对照组只加培养基,模型组给予不同浓度TNF-α,复制慢性胰岛素抵抗细胞模型。造模成功后设立空白对照组、模型组与家蚕提取物给药组,葡萄糖摄取试剂盒检测脂肪细胞的糖摄取情况;以0.2 nMTNF-α复制慢性胰岛素抵抗模型;与空白对照组比,家蚕提取物能显著促进脂肪细胞的糖摄取(P<0.01);与IR模型组比,家蚕提取物能促进胰岛素抵抗细胞的糖摄取(P<0.05)。采用 Western blot 法检测 IRS-1/p-IRS-1、Akt/p-Akt、NF-κB 的蛋白表达。IRS-1/p-IRS-1、Akt/p-Akt的蛋白表达,与空白对照组比,TNF-α能抑制IR模型组p-IRS-1、p-Akt的蛋白表达(P<0.05);与IR模型组比,家蚕提取物能上调IR脂肪细胞p-IRS-1、p-Akt蛋白表达(P<0.05),各组之间Akt蛋白表达无显著性变化。NF-κB的蛋白表达,与空白对照组比,TNF-α能增加IR模型组NF-κB蛋白表达(P<0.05);与IR模型组比,家蚕提取物能抑制IR脂肪细胞NF-κB蛋白表达(P<0.05)。表明家蚕提取物改善脂肪细胞的胰岛素抵抗状态,逆转TNF-α刺激的IRS-1/p-IRS-1与Akt/p-Akt、NF-κB蛋白表达。