低温NMDA受体拮抗剂MK-801逆行灌注对猪脊髓损伤的保护作用

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目的:脊髓缺血再灌注损伤造成的截瘫是大血管手术后的灾难性并发症,其发生机制及防治方法仍存在诸多争议,本文将探讨经副半奇静脉逆行灌注低温NMDA受体拮抗剂MK-801对脊髓损伤的中长期保护作用,以期建立一种简便、安全、可靠的脊髓保护方法。方法:健康成年西藏小型猪24头随机分为:A组(假手术组n=6),B组(对照组n=6)C组(低温林格氏液逆灌组n=6)和D组(低温MK-801逆灌组n=6)。B、C、D三组通过阻断降主动脉+左锁骨下动脉70min建立脊髓缺血再灌注损伤模型,阻断期间,C、D两组分别经副半奇静脉持续逆行灌注低温林格氏液(1000ml/h)与低温MK-801溶液(1000ml/h,0.01mg/ml);连续监测鼻咽温、心率、近端动脉压、远端动脉压,每10min行躯体感觉诱发电位检测,每30min行动脉血气分析;再灌注6h、24h、30d参照Tarlov标准进行后肢运动功能评分;再灌注30d处死所有动物,取L3节段脊髓行HE染色、尼氏体染色及微管结合蛋白(MAP-2)免疫组化检测。结果:成功建立脊髓缺血再灌注损伤模型,阻断期间,与A组相比,B、C、D组心率、近端平均动脉压及远端平均动脉压存在统计学差异;再灌注6h,D组Tarlov评分(3.2±0.8)明显优于B组(1.0±1.3)和C组(2.7±0.5),与A组(4.0±0.0)相比有统计学差异,再灌注24h,D组Tarlov评分(3.3士0.5)与B组(1.7土1.2)和C组(2.8土0.8)相比有显著差异,与A组(4.0士0.0)相比有统计学差异,再灌注30d,D组Tarlov评分(3.8土0.4)优于B组(2.7士0.8)和C组(3.5土0.5),与A组(4.0士0.0)相比有统计学差异;阻断期间,B、C、D三组均出现躯体感觉诱发电位(SSEPs)潜伏期延长、振幅减小,直至波形消失,D组与B、C组相比,SSEPs波形消失延缓,再灌注期间,B组3/6只动物SSEPs波形未恢复,C组1/6只动物SSEPs波形未恢复,D1/6只动物SSEPs波形未恢复;再灌注期间,B、C组与D组相比SSEPs潜伏期较长;HE&尼氏体染色显示,D组脊髓前角正常神经元计数(21士1.7)优于B组(15+2.3)和C组(18+2.4),与A组(24土1.5)相比存在统计学差异;与B、C组相比,D组白质空泡化程度低;免疫组化显示,C、D组MAP-2的表达优于B组。结论:同时阻断猪胸降主动脉及左锁骨下动脉,可以建立可靠的脊髓缺血再灌注损伤模型;经副半奇静脉逆行灌注低温NMDA受体拮抗剂MK-801,能够实现一定程度的脊髓保护作用。
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