通过与转基因技术相结合,体细胞核移植技术已经被广泛的应用于抗病育种以及人类医学动物模型的建立。由于生产克隆动物的效率还很低,限制了这一技术在应用领域的发展。提高核移植效率需要从两个方面入手,一是优化体细胞核移植操作方法；二是从分子和细胞水平研究核移植过程中的重编程机制,从而揭示生产克隆动物效率低的本质原因。本实验对牛体细胞核移植的各个环节进行了系统研究,并且用RNA干扰技术研究了HDAC1在早期胚胎发育中的作用。结果表明：(1)牛卵母细胞成熟培养18h到20h进行去核最佳,脉冲强度180v/mm-250v/mm,脉冲时间10μs,两次脉冲对克隆胚胎进行融合,融合率最高,200mg/ml PHA处理卵母细胞30min以及5mg/ml pronase处理供体细胞5min能显著提高克隆胚胎融合率,饲养层培养体系能有效提高克隆胚胎体外培养发育率,克隆牛多胚胎着床容易导致受体母牛腹腔积水,秋季进行胚胎移植受体牛妊娠率高于冬季移植；(2)si299能有效干扰牛卵母细胞和胚胎中HDAC1的表达,HDAC1下调不会对牛卵母细胞成熟产生影响,但会导致牛孤雌胚胎囊胚率和囊胚细胞数显著降低,组蛋白H3K14在HDAC1下调的孤雌胚胎中表现为乙酰化增强;3) HDAC1的下调并不影响组蛋白H3K14在牛胎儿成纤维细胞中的乙酰化状态,HDAC1持续下调会导致克隆胚胎发育能力下降和囊胚中细胞凋亡,50nM TSA处理牛克隆胚胎12h能显著提高牛克隆胚胎囊胚率。总之,本实验对牛体细胞核移植程序进行了优化,对牛早期胚胎发育过程中HDAC1的作用进行了有益探讨和论述,为研究体细胞核移植过程中重编程机制奠定了坚实基础。