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【目的】：近年来，肺癌已成为全世界发病率与死亡率最高的恶性肿瘤之一。而miR-145是潜在的肺癌“保护性”基因。本研究旨在探讨miR-145对于肺腺癌起始细胞发生的调控作用及潜在分子机制。【方法】：实时荧光定量PCR检测20例肺腺癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中miR-145和Oct4基因的表达水平。无血清培养法富集A549起始细胞微球，以A549起始细胞微球为研究对象，研究分为对照组、miR-145模拟物组、miR-145阻遏物组、模拟物阴性对照组、阻遏物阴性对照组。观察微球形态并定量分析微球形成能力，流式细胞术检测CD133+细胞比例，实时荧光定量PCR及Westernblot法检测Oct4表达水平， Western blot法分析上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关蛋白表达水平：包括EMT相关的转录因子（snail，slug），上皮细胞表面标志物（Cytokeratin18和E-cadherin），间充质细胞表面标志物（N-cadherin，Vimentin）。进一步实验分为miR-145模拟物+过表达Oct4组、miR-145阻遏物+沉默Oct4组、miR-145模拟物+沉默Oct4组、miR-145阻遏物+过表达Oct4组。定量分析各组微球形成能力，检测CD133+细胞比例，Western blot法检测Oct4及EMT相关蛋白表达水平。构建稳定过表达及阻遏miR-145的A549细胞株，无血清培养法富集起始细胞微球，建立先天性胸腺发育不良的裸鼠皮下接种荷瘤模型，将动物实验分为：无处理对照组、过表达miR-145组、阻遏miR-145组。分别观察小鼠致瘤情况，免疫组化检测Oct4表达水平，Western blot法检测肿瘤组织中CD133、Oct4及EMT相关蛋白表达水平。【结果】：肺腺癌组织中miR-145的表达量显著低于癌旁正常组织，而miR-145的表达水平与Oct4呈负相关关系。过表达miR-145可明显抑制细胞微球形成能力及CD133+标记细胞比例；miR-145可显著下调EMT相关转录因子Snail、Slug，间充质细胞标志Vimentin、N-cadherin的蛋白水平，上调上皮细胞标志E-cadherin、Cytokeratin18的蛋白水平；而抑制miR-145则明显增加A549起始细胞微球中CD133+细胞比例，微球形成能力增强，上调Snail、Slug、Vimentin、N-cadherin的蛋白水平，下调上皮细胞标志E-cadherin、Cytokeratin18的蛋白水平。而Oct4作为miR-145的靶向基因，可以一定程度上参与miR-145的调控作用。表现为过表达miR-145及沉默Oct4可以使肺腺癌起始微球的形成能力和CD133+细胞的比例均明显下调；而阻遏miR-145及过表达Oct4，微球形成能力和CD133+细胞的比例都明显增加。而Oct4基因也可以在一定程度上调控miR-145对EMT通路的抑制作用，表现为过表达miR-145及沉默Oct4可以明显抑制Snail，Slug，N-cadherin，Vimentin的蛋白表达水平，上调Cytokeratin18和E-cadherin的蛋白量。而阻遏miR-145及过表达Oct4可以明显上调Snail，Slug，N-cadherin，Vimentin的蛋白表达水平，下调Cytokeratin18和E-cadherin的蛋白量。而在裸鼠皮下接种荷瘤模型中，过表达miR-145可抑制小鼠成瘤能力，Oct4染色阳性表达明显下调，而CD133、Oct4蛋白表达明显下调，EMT相关蛋白Slug，间充质细胞表皮标志N-cadherin蛋白表达水平下降，上皮细胞表面标志Cytokeratin18和E-cadherin的蛋白量增加。【结论】：本课题旨在证实miR-145可能参与调控肺腺癌起始细胞的增殖能力，调节干细胞表型CD133+细胞比例，并且miR-145可抑制Oct4基因表达，同时miR-145可能通过靶向调控Oct4基因调节EMT参与的肺腺癌起始细胞的发生。