基于微流控技术蛋白质结晶芯片制作工艺的研究

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微流控芯片(Microfluidic Chip)是上个世纪九十年代初提出来的一项新型的分析技术,是当前分析科学最活跃的发展领域之一,代表了新世纪分析仪器的发展方向。微流控芯片的发展有赖于不断出现的微机电加工技术,微流控芯片的结构越来越复杂,功能也越来越多样化,由此,研究和探索高效简便的加工技术成为微流控技术发展的一个重要组成部分,本论文的研究工作将围绕着微流控蛋白质结晶芯片不同材料的性能与功能要求来进行相关加工技术的探讨。蛋白质结晶微流控芯片是一种用于蛋白质结品条件高通量、快速筛选的新设备,对于结构生物学的发展具有重要意义,是目前研究的热点。本论文根据蛋白质结晶系统的要求,设计了具有双层结构的微流控芯片。首先探索了基于SU-8负性光刻胶的双层芯片模具制作工艺,另外,为了在微流控芯片中形成均匀分散的蛋白液滴,我们对基于PDMS(聚二甲基硅氧烷)的微流控芯片的表面性质进行了研究,分别观察和评价了不同键合方法所制作液滴型PDMS微流控芯片应用于制备油包水和水包油两种液滴分散体系的效果;实验结果显示热扩散键合方法适用于制作油包水型PDMS液滴型微流控芯片,而等离子键合方法制作的PDMS芯片适于形成水包油型的液滴分散体系。为了实现芯片中样品液滴的有效操控和分配,我们在微流控芯片中集成了空气阀结构。通过改进微芯片模具制作工艺,形成具有半圆形剖面结构的微管道,保证了芯片上微阀的有效工作。最后,我们利用制备的蛋白质结晶芯片对溶菌酶进行了结晶试验,试验结果证实了该芯片应用于蛋白质结晶的有效性,为我们今后进一步研究自动化、高通量、实用性蛋白质结晶微系统奠定了良好的基础。
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