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硒对动物的生理机能具有重要作用,硒元素可以提高机体的抗氧化能力,维持细胞膜的正常结构功能增强机体免疫性能,促进动物生长发育等。由于蜜蜂在农业生态链中发挥重要传粉作用,蜜蜂产品价值高、用途广,因而蜜蜂在世界上得到广泛饲养。硒对蜜蜂的生理机能研究较少,蜜蜂对硒的营养需要还不明确。意大利蜜蜂是世界上饲养最多的西方蜜蜂亚种(Apis mellifera L.),探索意大利蜜蜂对硒的营养需要具有重要的理论和实际意义。本研究以意大利蜜蜂为研究对象,通过配制不同亚硒酸钠添加水平的饲粮,饲喂工蜂幼虫和成年工蜂(简称成蜂),测定幼虫体重、抗氧化、免疫、化蛹率、成蜂寿命、硒蛋白合成相关基因mRNA表达水平等指标,在生理生化和分子生物学水平上探索硒对蜜蜂生理机能的影响;以化蛹率、成蜂寿命等为指标做拟合曲线,获得意大利蜜蜂工蜂幼虫及成蜂饲粮中适宜硒水平。试验一:饲粮亚硒酸钠水平对意大利蜜蜂幼虫的影响。取1日龄(1d)意大利蜜蜂工蜂幼虫1440只,平均分为两批,每批720只,一批用于化蛹率、羽化率的测定,一批用于生理生化指标和分子生物学指标的测定。两批幼虫均按单因素完全随机设计分成6组,每组内5个重复,每个重复24只幼虫。分别饲喂亚硒酸钠添加量为0.0 mg·kg-1、0.2 mg·kg-1、0.4 mg·kg-1、0.6 mg·kg-1、0.8 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1的日粮。获得以下结果:(1)日粮硒水平对意大利蜜蜂工蜂幼虫的化蛹率及体重影响显著。日粮添加亚硒酸钠水平为0.4 mg·kg-1时幼虫化蛹前体重显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,日粮添加亚硒酸钠水平为0.2 mg·kg-1时,幼虫化蛹率显著提高(P<0.05)。(2)日粮硒水平对意大利蜜蜂工蜂幼虫的抗氧化能力和免疫能力影响显著。与对照组相比,日粮添加亚硒酸钠水平为0.2-0.6 mg·kg-1时显著提高了幼虫的T-AOC(P<0.05),日粮添加亚硒酸钠水平为0.2-0.8 mg·kg-1时显著提高了幼虫的T-SOD活性(P<0.05),各试验组均显著降低了幼虫的MDA含量(P<0.05)。日粮添加亚硒酸钠水平为0.4 mg·kg-1时幼虫的PO活性显著高于对照(P<0.05)。(3)日粮硒水平对意大利蜜蜂工蜂幼虫硒蛋白合成相关基因的影响显著。日粮添加亚硒酸钠水平为0.6 mg·kg-1时5日龄幼虫的SelD、SerRs、Sbp1、Sbp2基因的mRNA水平显著高于对照(P<0.05)。(4)由幼虫化蛹率做拟合曲线得出意大利蜜蜂工蜂幼虫的适宜硒水平为0.32-0.36 mg·kg-1。试验二:饲粮亚硒酸钠水平对意大利蜜蜂离群成蜂的影响。取1d意大利蜜蜂工蜂2450只,分为两批,1200只用于测定存活率,1250只用于测定生理生化指标和分子生物学指标。两批成蜂均按单因素完全随机设计分成5组,分别饲喂亚硒酸钠添加水平为0.0 mg·kg-1、1 mg·kg-1、2 mg·kg-1、3 mg·kg-1、4 mg·kg-1的日粮。获得以下结果:(1)日粮硒水平对意大利蜜蜂离群成蜂的寿命影响显著。日粮添加2 mg·kg-1亚硒酸钠的试验组成蜂的平均寿命显著高于其余各组(P<0.05)。(2)日粮硒水平对意大利蜜蜂离群成蜂的抗氧化能力和免疫能力影响显著。与对照组相比,日粮添加亚硒酸钠水平为1mg·kg-1、2 mg·kg-1时显著提高了离群成蜂的总抗氧化能力(P<0.05),日粮添加亚硒酸钠水平为1-3 mg·kg-1时显著提高了离群成蜂的T-SOD活性(P<0.05),各试验组均显著降低了离群成蜂的MDA含量(P<0.05)。日粮添加亚硒酸钠水平为1 mg·kg-1时成蜂的PO活性显著高于对照组(P<0.05)。(3)日粮硒水平对意大利蜜蜂成蜂硒蛋白合成相关基因表达的影响显著。日粮添加亚硒酸钠水平为2 mg·kg-1时,5d成蜂的SelD、SerRs、Sbp1、Sbp2基因的mRNA水平显著高于对照组(P<0.05)。(4)由离群工蜂寿命和抗氧化性做拟合曲线得出意大利蜜蜂离群工蜂的适宜硒水平为0.56-0.63 mg·kg-1。本研究表明,室内人工饲养意大利蜜蜂工蜂幼虫时,幼虫饲粮中硒的适宜水平为0.32-0.36 mg·kg-1;离群饲养成蜂时,成蜂饲粮中硒的适宜水平为0.56-0.63 mg·kg-1。