大黄藤属野生资源,资源量小,零星分散。随着制药业的发展,对野生大黄藤的采集、消耗,使这一药用植物资源急剧减少,濒于枯竭。因为其药用价值,大黄藤在化学及药理方面的研究层出不穷。但研究其繁育方式的探究并不是丰富。本实验在前人的基础上探究了大黄藤的扦插和组织培养两种种苗繁育方式,以期建立大黄藤良种繁育技术,解决大黄藤在市场上供不应求的需求,为后期大黄藤的深入研究提供技术支持。本次实验研究结果如下:1大黄藤扦插生根实验(1)在本次大黄藤扦插繁殖实验中。以大黄藤带芽茎段作为插穗,设计的正交实验以期研究基质、留叶数、NAA浓度等因数对大黄藤扦插的生根率及根系质量的影响得出结论。基质是本次大黄藤扦插实验生根率、平均根数及平均根长的主导因子;NAA浓度对大黄藤扦插生根率及根系质量无明显影响,留叶数对生根率有明显影响但对根系质量无明显影响。从而得到大黄藤扦插实验的最佳组合为A3B1C3,即不留叶大黄藤茎段,蘸900 mg/L的生根剂NAA后插于基质珍珠岩:椰糠:河沙中效果最好。(2)在大黄藤扦插繁殖实验中,还采用了随机区组实验设计,研究插条木质化程度和插条下端切口类型对大黄藤扦插生根的影响。得到结论:插条的木质化程度对大黄藤的各项生根指标存在较强的影响。三种木化程度的插条中,半木质化的插条的各项生根指标最优,生根率高达86%,显著高于未木质化和木质化插条;在平均根数上半木质化和木质化无差别,仅8条,但是与未木质化的平均根数存在显著性差异;半木质化的平均根长达7.4 cm。所以,总体而言,半木质化插条更适宜进行大黄藤扦插生根实验。另一组随机区组实验结果可知,插穗的切口类型对于大黄藤扦插生根存在一定的影响。实验结果得到下端斜切是大黄藤扦插生根实验的最佳切口类型,其生根率、平均根数、平均根长分别为87%、7.7条、6.5 cm。总体生根指标皆优于下端平切和上下端斜切。2大黄藤带芽茎段诱导丛生芽的组织培养(1)实验成功建立了无菌体系,当大黄藤茎段用75%C2H5OH(酒精)灭菌10s加上0.01%的升汞(Hg Cl2)消毒8min中时的灭菌效果最好,污染率最低,而且不破坏外植体能使其正常健康生长发育。(2)外植体取材季节也对此次组织培养实验有一定的影响,对比了春季与秋季的取材后的植株培养结果中得出结论,在春季(4月-5月)采集的外植体,其污染率和死亡率分别为11%和7%,都比较低。所以春季更适合作为大黄藤组织培养的最佳取材季节。(3)在大黄藤的腋芽诱导以及丛生芽的增殖培养中,都对基本培养基进行了实验并筛选出最适宜两个阶段的不同的最佳基本培养基。适宜大黄藤腋芽诱导以及丛生芽增殖培养的最佳基本培养基分别为1/2MS和WPM,用这两种作为不同阶段的基本培养基,得到的实验数据中,污染率小,植株的生长状况较好,而且萌动时间与其他基本培养基相比最短。(4)在比较IAA、NAA、IBA这三种生长素不同浓度对大黄藤腋芽诱导的影响时,在最佳基本培养基上附加6-BA0.5 mg/L时,试验得到结果,最适合大黄藤腋芽诱导的生长素是当NAA浓度为0.2 mg/L时,不定芽萌发率最高,达到83%(5)在探究细胞分裂素对于不定芽诱导的影响时,在最佳基本培养基上附加NAA0.5mg/L时得到结论当6-BA浓度达到1.5 mg/L时,不定芽诱导率最高,高达84%,所以细胞分裂素6-BA1.5 mg/L最有利于大黄藤不带芽茎段的诱。(6)设计尝试了各种基本培养基+激素组合浓度配比、不同蔗糖浓度的影响以及活性炭的不同浓度实验,均没有诱导大黄藤成功生根。3大黄藤愈伤组织诱导的研究(1)升汞消毒时间为5 min是大黄藤嫩叶培养的最佳消毒时间(2)本次愈伤组织诱导实验中,只有不带芽茎段诱导出愈伤组织,嫩叶无法诱导出愈伤组织,得到结果MS+6-BA0.2 mg/L+NAA1.0 mg/L是诱导愈伤组织的最佳培养基,愈伤诱导率达72.6%。(3)此次愈伤组织分化实验中,分化率普遍不高,最高仅为65%。实验结果得到愈伤组织分化的最适组合为A1B2C2即1/2MS+2,4-D0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT1.0mg/L是此次大黄藤不带芽茎段愈伤组织分化的最佳培养基。而且只有生根素种类和6-BA浓度这两个因素对此次分化实验有显著性的影响。(4)本次实验并没有使得愈伤分化出的芽诱导生根,也没有成功让愈伤组织分化出的不定芽增殖成功。