【摘 要】
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该文将带有哺乳动物细胞信号肽的人白细胞介素-6(hIL-6)基因片段构建到大肠杆菌-酵母细胞穿梭型载体质粒pYES2中,获得表达质粒pYES2-hIL-6.同时使用四种不同的酿酒酵母细胞的
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该文将带有哺乳动物细胞信号肽的人白细胞介素-6(hIL-6)基因片段构建到大肠杆菌-酵母细胞穿梭型载体质粒pYES2中,获得表达质粒pYES2-hIL-6.同时使用四种不同的酿酒酵母细胞的转化方法进行了对比实验,从而找到酿酒酵母细胞最佳的转化条件为:40%PEG4000、0.1M LiAc、0.01M TE,并加入Carrier DNA(小牛胸腺DNA),热冲击时间为25min.另外,将表达质粒pYES2-hIL-6转化到酿酒酵母细胞DBY747中,并将获得的转化在含2%乳糖的YP培养基中培养到OD<,600>=1.0左右,后用2%的半乳糖进行了诱导表达.结果发现,在培养上清中的人白细胞介素-6的分泌量较低,而大量的表达蛋白存在于酵母细胞内.
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