新疆部分地区伯氏疏螺旋体分子流行病学调查

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莱姆病(Lyme disease)是一种自然疫源性传染病,它是由伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)引起的人兽共患病。蜱是传播该病重要的传播媒介,啮齿动物是其主要宿主动物。研究证实,新疆存在着多个莱姆病自然疫源地。2019年至2021年间,在新疆阿拉山口、吉木萨尔、伊犁地区、乌苏、青河、于田、呼图壁等7个地点采集样品合计423份,其中蜱276份(1 000余只蜱),鼠类147只。蜱和鼠的肾脏和膀胱组织研磨成匀浆,通过0.22μm滤膜接种于BSK-H培养基中,33℃5%浓度CO2培养箱中培养,经传代、纯化培养,获得4株莱姆病病原伯氏疏螺旋体,分属于3个基因型,即2株B.bavariensis基因型,1株为B.garinii基因型,1株为伯氏疏螺旋体未定基因型。为了提高试验的准确率和全面性,本研究应用实时荧光定量PCR(16Sr RNA)和巢式PCR(5S-23Sr RNA间隔区)两种方法对423份样本进行伯氏疏螺旋体检测。结果表明,实时荧光定量PCR方法检测新疆地区媒介生物蜱和宿主动物鼠类携带伯氏疏螺旋体阳性率为8.51%(36/423);巢式PCR方法检测其阳性率为9.22%(39/423)。两种方法检测结果基本无明显差异。基于伯氏疏螺旋体5S-23Sr RNA间隔区片段的巢式PCR扩增产物通过基因序列测序比对分析,数据分析结果表明,新疆地区流行的伯氏疏螺旋体主要有4个基因型,伽氏疏螺旋体(B.garinii)占40.63%(13/32)、阿弗西尼疏螺旋体(B.afzelii)占12.5%(4/32)、B.bavariensis基因型占9.38%(3/32)、伯氏疏螺旋体未定基因型占37.50%(12/32)。基于NJ算法的5S-23S序列构建了32份样本的系统发育树。结果表明,该系统发育树主要分属于2个大分支,11份聚集在一个分支上,其中9株在系统发育上接近B.garinii group与B.bavariensis,与俄罗斯、西伯利亚、台北等地的分离株进化关系较近;2株与B.burgdorferi sensu stricto在同一分支,与美国B.burgdorferi s.s B31株遗传进化关系接近;21株聚集在另一个分支上,其遗传进化关系接近我国东北的B.garinii mgds。提示新疆地区伯氏疏螺旋体具有丰富的遗传多样性。新疆是莱姆病的自然疫源地,开展媒介和宿主中伯氏疏螺旋体感染调查及基因分型研究对预测不同地区莱姆病发生的风险有非常重大的现实意义,以期为新疆地区莱姆病的防控提供科学依据。
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