新疆台兰河放线菌多样性及红枣黑斑病拮抗菌次生代谢产物挖掘

来源 :塔里木大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:cox_7261
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新疆阿克苏台兰河流域独特的气候条件,潜藏着丰富的微生物资源。本研究以台兰河淤泥样品为研究对象进行可培养放线菌多样性研究;并选择2株潜在链霉菌新种进行多相分类;筛选红枣黑斑病病原菌(Alternaria tenuissima)拮抗活性菌株,选择1株抑菌效果较好的放线菌TRM68291进行次生代谢产物分离鉴定。研究结果如下:采用13种分离培养基,对新疆台兰河淤泥样品进行可培养放线菌的分离。分离菌株通过16S rRNA基因序列分析,统计分离放线菌多样性。共分离获得265株放线菌,分布于放线菌门的(Streptomycineae,Pseudonocardineae,Streptosporangineae,Corynebacterineae,Micrococcineae)5个目,(Streptomycetaceae,Thermomonosporaceae,Pseudonocardiaceae,Nocardiaceae,Nocardiopsaceae,Promicromonosporaceae,Actinosynnemataceae,Jonesiaceae)8个科,(Streptomyces,Actinomadura,Amycolatopsis,Nocardia,Nocardiopsis,Promicromonospora,Rhodococcus,Saccharothrix,Jonesia)9个属,87个已知物种和8个潜在放线菌新物种。对2株潜在放线菌新物种TRM68295和TRM68348进行菌株形态特征、生理生化特征、化学分类特征和基因型特征分析,确定菌株TRM68295和TRM68348为链霉菌属新物种,将TRM68295命名为淡黄色链霉菌(Streptomyces albicerus),模式菌株编号CCTCC AA 2018085T=KCTC 49272T;TRM68348命名为台兰河链霉菌(Streptomyces tailanensis),模式菌株编号CCTCC AA2018086T=KCTC 49274T。将分离到的放线菌进行小批量发酵,利用琼脂扩散法测定放线菌发酵液对红枣黑斑病病原菌的抑菌活性。筛选获得拮抗活性菌株65株,均为链霉菌属,占分离放线菌的24.5%。通过活性筛选和HPLC分析发现李维斯链霉菌TRM68291的抑菌活性较好且次生代谢产物丰富。采用Am6液体培养基为发酵培养基于28℃,180 rpm条件下进行发酵,发酵液经AB-8型大孔树脂富集,及硅胶层析、凝胶层析和制备液相等方法分离纯化,分离得到3个单体化合物,通过1H NMR和13C NMR谱数据,及HSQC、HMBC二维谱图数据,结合微普数据库和文献谱图数据比对分析,3个化合物被鉴定为:(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸、(1R,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸和L-色氨酸。
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