目的紫外线辐射（ultraviolet radiation,UVR）可以通过诱导炎症反应诱发皮肤光老化。皮肤免疫系统（skin immune system,SIS）中的调控因子和炎症因子在维持机体稳态和介导皮肤光老化中发挥重要作用,但详情尚不清楚。本研究立足于探讨长波紫外线（ultraviolet A,UVA）辐射诱发人皮肤成纤维细胞（human dermal fibroblasts,HDFs）光老化的作用及分子机制,为防治UVA介导的皮肤光老化提供新的理论依据。HDFs作为皮肤真皮层的重要细胞,通过释放胶原蛋白和多种基质成分维持皮肤组织的正常生理功能。研究表明,皮肤组织中HDFs表达丰富的缝隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）,且其在介导细胞间通讯和维持皮肤正常生理功能中发挥关键作用,并可受多种炎症因子调节。UVA辐射可诱导HDFs活化,另一方面UVA辐射也可诱发皮肤局部组织的炎症反应,并造成皮肤光老化,且HDFs光老化与多种皮肤疾病密切相关。然而,UVA辐射通过炎症反应诱发皮肤光老化的详细机制仍然不清。在早期的研究中我们也首次发现,HDFs中的Cx43作为重要因子,可对皮肤光老化的重要指标基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）进行调控。基于上述研究结果,我们推测,UVA可诱导皮肤组织的局部免疫应答,并释放炎性细胞因子,进而通过影响Cx43的表达及功能影响皮肤中MMPs的水平,最终造成皮肤光老化。本研究应用多种细胞和分子生物学方法,旨在探讨UVA诱发炎症导致皮肤光老化的潜在机制,将有助于为抗皮肤老化和皮肤肿瘤药物的开发提供新的理论依据。方法利用CCK-8法筛选UVA辐照HDFs的最佳条件;应用ELISA法检测HDFs上清中MMP-1、MMP-9以及TNF-α的水平,利用q RT-PCR法和Western Blot法检测细胞Cx43 m RNA及蛋白表达情况;使用重组人TNF-α刺激HDFs,利用Western Blot法检测细胞中Cx43、MMP-1和MMP-9的表达情况;将细胞分为空白组、阴性对照组、si RNA-1组和si RNA-2组,取各组对应的si RNA分别瞬时转入HDFs,并检测细胞上清MMP-1和MMP-9的水平;构建UVA照射对照组、UVA组、UVA+TNF受体（16）中和抗体组和TNF受体（16）中和抗体组细胞,应用q RT-PCR和ELISA法分别检测细胞中Cx43 m RNA表达及上清中MMP-1和MMP-9的水平。结果1、5 J/cm~2强度UVA辐照可时间依赖性地提高HDFs产生MMP-1和MMP-9的水平。2、UVA辐照后可显著提高HDFs产生炎性细胞因子TNF-α的水平并降低其表达Cx43。3、基因沉默Cx43可明显促进HDFs产生更多MMP-1和MMP-9。4、炎性细胞因子TNF-α显著抑制HDFs表达Cx43,并提高其产生MMP-1和MMP-9的水平;5、利用TNF受体1中和抗体阻断HDFs表面TNF受体1,本被UVA辐照下调的Cx43 m RNA以及上调的MMP-1均接近正常水平。结论1、UVA可诱导HDFs释放炎性细胞因子TNF-α并降低其表达Cx43,从而促进其分泌MMP-1和MMP-9,导致HDFs的光老化;2、阻断HDFs表面的TNF受体1可明显改善UVA对Cx43的抑制,及其对MMP-1释放的促进。