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目的1.研究GART在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,初步分析GART异常表达与HCC发生发展的关系。2.利用血清饥饿释放试验研究肝癌细胞株Hep G2和BEL-7404增殖过程中GART的表达变化,初步探讨GART在此过程中的作用,旨在能够进一步揭示HCC的分子发病机制,以期为其治疗提供新的靶点。方法1.采用Western blot技术检测8例HCC及癌旁新鲜冰冻组织中GART的表达情况;采用免疫组化方法检测96例HCC及癌旁组织石蜡切片中GART和增殖指标Ki-67的表达情况,并结合肝癌临床病理资料分析GART与HCC患者的年龄、性别、肿瘤分级、转移、肿瘤体积、血清AFP水平、肝硬化以及血管侵袭等因素之间的关系,并对96例HCC患者进行随访,随访结果应用Kaplan-Meier法分析其生存率,以及单因素和Cox危险比例模型多因素分析GART与HCC预后的关系。2.采用血清饥饿释放同步化处理Hep G2和BEL-7404细胞,用流式细胞仪检测两株细胞的细胞周期的变化,Western blot检测血清饥饿释放过程中GART、cyclin A和cyclin D1的表达情况。干扰GART表达后用流式细胞仪检测细胞周期及Western blot检测GART、PCNA的表达变化。结果1.免疫组化和Western blot分析显示,GART在HCC中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。GART的表达强度与HCC病理分级(P=0.001)﹑肿瘤体积(P=0.043)、肿瘤数量(P=0.020)和转移(P=0.031)之间的关系有统计学意义,相关性分析表明GART与Ki-67表达呈正相关(γ2=0.443;P<0.01)。Kaplan-Meier分析显示GART在HCC中的高表达与患者总生存率的降低显著相关(P=0.002)。单因素分析表明GART与HCC患者的不良预后有关(P=0.001)。Cox危险比例模型分析显示GART可做为HCC患者预后的独立指标(P=0.002)。2.血清饥饿造成HepG2和BEL-7404细胞生长周期停滞,GART蛋白表达下降,与此同时,细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D1的表达水平也降低。血清释放后刺激Hep G2和BEL-7404细胞增殖,上述分子呈现相反的变化。干扰GART的表达后,增殖指标PCNA的表达降低,肝癌细胞株的增殖受到抑制。结论1.GART在HCC中高表达,并且可作为HCC患者独立的预后指标,提示GART可能与肝癌的发生发展相关。2.在肝癌细胞增殖过程中,GART表达上调;干扰GART的表达后,肝癌细胞的生长受到抑制。推测GART可能参与细胞周期进程和细胞增殖的调节。