第一部分Leptin对内皮细胞的氧化应激以及增殖的影响目的:观察Leptin对脐静脉内皮细胞（HUVECs）的氧化应激作用及增殖的影响。方法:（1）取新生婴儿脐带,应用Ⅱ型胶原酶消化分离培养HUVECs,并应用Ⅷ因子抗体对培养的细胞进行免疫荧光鉴定;（2）应用Leptin对HUVECs进行干预后检测内皮细胞内活性氧簇（ROS）水平的变化;（3）运用MTT比色法测定leptin及抑制剂对HUVECs增殖的影响,并分别测定增殖率及抑制率。结果:（1）在体外经Ⅱ型胶原酶消化法分离培养的内皮细胞经鉴定95%以上为内皮细胞;（2）Leptin能显著增加HUVECs内活性氧簇的产量,（与对照组比较,P＜0.01）,上述变化可以被NADPH氧化酶抑制剂—二苯基碘（DPI）和PKC抑制剂（PKC inhibitor）所抑制;（3）Leptin能显著促进HUVECs增殖,与对照组比较,增殖率达36%,运用DPI和PKC抑制剂可以明显抑制leptin对HUVECs的增殖作用,DPI的抑制率达37%,PKC抑制剂的抑制率达43%,（与对照组比较,P均＜0.01）。结论:（1）体外消化分离培养的脐静脉内皮细胞纯度较高可以成功运用于实验;（2）Leptin能提高HUVECs内ROS的产量,即leptin可以促进内皮细胞的氧化应激反应;（3）Leptin可以通过PKC途径提高ROS水平促进HUVECs增殖。第二部分Leptin对HUVECs的氧化应激作用机制的研究目的:观察leptin在诱发HUVECs的氧化应激反应过程中,p-PKC以及NADPH氧化酶关键亚基NOX2、NOX4 mRNA表达水平的变化以及二者之间的关系,进一步探讨leptin诱发的内皮细胞氧化应激作用的机制。方法:分别应用不同浓度的leptin以及不同抑制剂干预内皮细胞,然后运用Westernblotting法测细胞内p-PKC水平,运用RT-PCR法检测细胞内的NOX2、NOX4 mRNA的表达水平的变化。结果:1)Leptin能显著增加HUVECs内的p-PKC水平（与对照组比较,P＜0.01）;（2）Leptin能促进HUVECs中NADPH氧化酶NOX2、NOX4的mRNA的表达,上述变化可以被PKC抑制剂所抑制。结论:（1）Leptin能显著提高HUVECs内p-PKC水平;（2）Leptin可以通过PKC途径上调HUVECs内NADPH氧化酶mRNA的表达。