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目的:通过分析小鼠脓毒症心肌损伤,以及辛伐他汀和艾司洛尔给药后TLR4/JNK信号通路的变化情况,进而探讨药物对于心肌损伤保护的作用及分子机制。为临床此类药物的开发提供一定的理论依据。第一部分以脓毒症心肌损伤小鼠为研究对象,分为3组,模型组、对照组、假手术组,模型组腹腔注射LPS,对照组不做任何处理、假手术组注射等量生理盐水;每组取10只小鼠记录一般状态和生存情况;另外10只,分别取心肌组织进行HE染色,ELISA检测血清中cTnI。(1)造模后24 h,LPS处理组的小鼠表现异常,行为方面:活动量显著降低,行动迟缓;生活状态:毛发竖立松乱,眼睑有黏稠分泌物、寒战;精神方面:萎靡不振,对外界刺激的反应减弱。而对照组和假手术组小鼠没有出现这些表征。对三组小鼠进行了为期一周的生存分析,结果显示对照组和假手术组小鼠无死亡,而模型组有4只小鼠死亡,存活率为60%。(2)心肌组织HE染色结果,与对照组和假手术组相比,LPS诱导的脓毒症心肌损伤模型组,心肌纤维排列不规则;一些区域发生断裂变形,胞质均质化;一部分横纹模糊甚至消失,染色质松散;可见血管出血,炎性细胞浸润。(3)与对照组、假手术组比较,结果表明LPS诱导的脓毒症心肌损伤小鼠,血清中c TnI水平均显著升高(P<0.05),差异具有统计学意义。假手术组c TnI水平与对照组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05),证明造模成功。第二部分将小鼠分为4组,每组10只,模型组、对照组、艾司洛尔组、辛伐他汀组,艾司洛尔组和辛伐他汀组在模型组基础上,分别给予艾司洛尔、辛伐他汀24h,剂量为15mg/kg,ELISA检测血清cTnI、TNF-α含量,Western blot检测心肌中TLR4、JNK、p-JNK、c-jun、p-c-jun的表达。(1)模型组小鼠有精神萎靡、行动迟缓、毛发蓬乱等状况;艾司洛尔组、辛伐他汀组小鼠均出现上述症状,但情况好于模型组;而对照组无上述症状。(2)ELISA检测发现与对照组相比,模型组小鼠血清中cTnI显著升高,表明发生心肌损伤,艾司洛尔组、辛伐他汀组cTnI含量要低于模型组(P<0.05),高于对照组,表明两种药物对心肌损伤有一定保护作用;两组间比较,艾司洛尔cTnI含量低于辛伐他汀组(P<0.05)。(3)TNF-α表达分析,模型组血清中TNF-α明显高于对照组,而司洛尔组、辛伐他汀组较模型组相比显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),炎症反应降低。(4)Western blot结果示p-JNK/JNK、p-c-jun/c-jun表示磷酸化指标的相对表达量。四组小鼠Western blot结果显示模型组TLR4、JNK、p-JNK均显著高于对照组(P<0.05)而c-jun、p-c-jun虽略有升高,但无统计学差异。两种给药组TLR4、JNK、p-JNK、c-jun指标有不同程度降低(P<0.05),而p-c-jun无明显差异(P>0.05)。第三部分选用小鼠心肌细胞HL-1,分为四组,对照组、LPS组、艾司洛尔组、辛伐他汀组,LPS组细胞经LPS处理24h,艾司洛尔组、辛伐他汀组细胞经LPS处理后,再分别给药处理2h,ELISA和Western blot检测上述。结果发现:LPS组cTnI、TNF-α含量、TLR4、JNK、p-JNK表达高于对照组(P<0.05),而艾司洛尔和辛伐他汀可抑制cTnI、TNF-α、TLR4、JNK、p-JNK的高表达。(1)与对照组相比,LPS组细胞上清cTnI、TNF-α显著升高(P<0.05),而辛伐他汀组、艾司洛尔组cTnI、TNF-α含量明显低于LPS组(P<0.05)。(2)Western blot结果,LPS组TLR4、JNK、p-JNK明显高于对照组(P<0.05),而c-jun、p-c-jun无明显变化(P>0.05);与LPS组相比,辛伐他汀组、艾司洛尔组TLR4、JNK、p-JNK显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在脓毒症心肌损伤中,LPS激活TLR4,TLR4促进JNK磷酸化,激活JNK通路,从而引发炎症反应,造成心肌损伤;艾司洛尔、辛伐他汀可在不同程度抑制TLR4、JNK的表达。