背景糖尿病性心肌病(Diabetic cardiomyopathy,DCM)是导致糖尿病患者心力衰竭和死亡的主要原因之一,是指由于固有的心肌功能障碍而导致的心脏结构和功能异常,与其他血管并发症无关。DCM占糖尿病患者死亡的50%-80%,是2型糖尿病患者死亡的主要原因。DCM发病机制复杂,可能与钙平衡失调、代谢紊乱、线粒体损伤、血管功能障碍等有关。临床上针对DCM尚无有效的治疗方法。甲基异茜草素-1-甲醚(Rubiadin-1-methyl ether,R1ME)是一种从茜草科植物中分离得到的蒽醌类化合物。具有一般蒽醌类化合物的药理作用如:如抗癌、抗炎,改善心肌纤维化的作用。诊断级低强度超声微泡爆破技术(VFLASH)联合R1ME能有效提高局部药物浓度,改善治疗效果,作为新型的给药技术,为糖尿病心肌病靶向治疗提供新的途径。目的本实验通过观察VFLASH联合R1ME对DCM大鼠心功能的影响探讨诊断级低VFLASH联合R1ME在改善DCM心肌微循环的作用及其机制。方法1.通过腹腔注射链脲佐菌素,并给于高糖高脂饲料喂养4周建立DCM大鼠模型。使用动物心脏超声仪检测大鼠的心功能。2.使用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量检测试剂盒,超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性检测试剂盒检测血清中MDA的含量和SOD的活性。3.使用HE染色、Masson染色和VG染色检测DCM大鼠的心肌组织形态。4.使用NO含量检测试剂盒检测NO的释放量。5.采用Western blot检测DCM大鼠心肌组织中PI3K、Akt和eNOS的表达量。6.采用免疫组化检测DCM大鼠心肌组织中PI3K、Akt和eNOS的表达情况。7.采用免疫组化检测DCM大鼠心肌组织中新生血管标志物血小板-内皮细胞粘附分子(Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)的表达情况。结果1.使用动物心脏超声仪检测大鼠的心功能,Model组的大鼠的心功能减弱,VFLASH+R1ME组的大鼠的心功能得到改善。2.Model组的大鼠血清中MDA的含量升高,SOD的活性降低。VFLASH+R1ME组的大鼠MDA的含量降低,SOD的活性增加。3.HE染色、Masson染色和VG染色结果显示Model组的心肌纤维排列紊乱无顺应性、肌纤维结构模糊、细胞间隙增宽,心肌细胞形态改变明显,细胞肿胀肥大、变形,细胞核体积明显增大,心肌细胞间存在大量的成纤维细胞及炎性细胞浸润。VFLASH+R1ME组的大鼠的心肌形态趋于正常。4.Model组血清中NO的含量减少,VFLASH+R1ME组血清中NO的含量升高。5.Western blot检测结果显示Model组心肌组织中PI3K、Akt和eNOS的表达量均减少,VFLASH+R1ME组心肌组织中PI3K、Akt和eNOS的表达量升高。6.免疫组化结果显示Model组心肌组织中PI3K、Akt和eNOS的表达量均减少,VFLASH+R1ME组心肌组织中PI3K、Akt和eNOS的表达量升高。7.免疫组化的结果显示Model组心肌组织中新生血管标志物CD31的表达无明显变化,VFLASH+R1ME组新生血管标志物CD31的表达升高。结论VFLASH联合R1ME可以通过激活PI3K-Akt-eNOS信号通路而促进内皮细胞的血管新生,同时降低氧化应激反应,对新生血管起到保护性作用。