香鳞毛蕨抗犬小孢子菌和絮状表皮癣菌活性物质研究

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香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans(L.)schott)为多年生落叶草本,属于鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,生长于高寒地区的滑石坡、森林中的碎石坡和火山周围的岩浆缝隙中。我国的东北、华北、俄罗斯、日本以及欧美均有分布。另据五大连池地方志记载,达斡尔族居民在几百年前就已经使用香鳞毛蕨水煎液治疗多种疾病,尤其对皮肤病疗效独特。犬小孢子菌(Microsporum canis)是寄生在猫、狗、兔等动物身上并能够感染人类的一种丝状病原真菌,属于小孢子菌属,可引起头癣;絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)同样为丝状病原菌,可以感染人和动物,引起体癣、股癣、足癣、甲癣等。本文对香鳞毛蕨水提液进行大孔树脂柱色谱,用水、30%、60%、95%乙醇依次洗脱,而后对各个组分进行抗犬小孢子菌和絮状表皮癣菌活性成分筛选。结果表明30%乙醇组分的抗菌效果最好,MIC分别为犬小孢子菌:0.4-0.8 mg/mL,絮状表皮癣菌:0.8-1.6 mg/m L;MFC分别为犬小孢子菌:小于0.8 mg/mL,絮状表皮癣菌:1.6-3.2 mg/m L,最终确定30%乙醇组分为抗犬小孢子菌和絮状表皮癣菌的有效部位。本文通过正相硅胶柱色谱、反相(MCI、ODS、RP-18)柱色谱、SephadexLH-20柱色谱、TLC等技术对30%乙醇组分进行分离、纯化,得到单体化合物28个,通过UV、IR、MS、NMR并结合文献报道确定其结构,其中包括色原酮类化合物4个、黄酮类化合物5个、倍半萜类化合物3个、香豆素类化合物2个、芳香类化合物11个、木脂素类3个。其中新化合物4个,分别命名为:Dryofrachromen A,Dryofrachromenoside A,Dryofrachromenoside B,Dryofragranoside J;已知化合物24个,其中2 0个化合物为首次从鳞毛蕨属植物中分离得到,分别为:dihydroconiferylalcohol,Isoscopoletin,pinoresinol,salicifoliol,1,3-dihydroxyl-5-propylbenzene,7-Epiloliolide,3β-hydroxy-5α,6α-epoxy-7-megastigmen-9-one,6-hydroxy-4,7-megastigmadiene-3,9-dione(Dehydrovomirolio),(E)-3-(4-hydroxyphenyl)acryic acid,salicylic acid,Caffeic acid,4-Hydroxy-acetophenone,3,4-Dihydroxy acetophenone,eriodictyol,2-ethyl-6-hydroxybenzoic acid,7,9′;7′,9-diepoxylignans pinoresinol-4,4′-di-O-β-D-glucoside,3,5-dimethoxyphenylglucopyranoside,esculetin,isoorientin,Isovitexi。通过对所分离得到的6个单体化合物的抗菌活性试验,结果表明3-甲氧基-4-羟基-苯丙醇、七叶内酯、5,7-二羟基色原酮、香豆酸具有较强的抗犬小孢子菌和絮状表皮癣菌活性。本文对香鳞毛蕨抗犬小孢子菌和絮状表皮癣菌活性组分进行了研究,并对得到的单体化合物进行了抗菌活性筛选,最终得到了有活性的先导化合物,为今后深入研究由犬小孢子菌和絮状表皮癣菌引起的皮肤病的治疗提供了新的药用资源。本项目得到黑龙江省自然科学基金的资助。
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