【摘 要】
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呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus. RSV)是造成世界范围内婴幼儿及成人呼吸道感染的首位病毒病原,迄今为止尚没有针对RSV感染的可靠疫苗和治疗药物问世,RNA干扰(R
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呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus. RSV)是造成世界范围内婴幼儿及成人呼吸道感染的首位病毒病原,迄今为止尚没有针对RSV感染的可靠疫苗和治疗药物问世,RNA干扰(RNA interference ,RNAi)和脱氧核酶(Doxyribozyme,DNAzyme,DZ)技术是能够有效抑制目的基因表达的两种基因治疗策略,已被广泛用于基因功能、肿瘤及病毒感染的研究。随着分子生物学和分子病毒学的发展,尤其是对病毒基因结构和功能的研究取得长足进步,基因水平特别是基因转录后水平阻断病毒复制成为当前研究热点。M2基因在RSV的转录和复制中起着重要作用,为了从基因水平阻断RSV感染,本研究针对RSV M2基因mRNA设计、构建表达小发卡结构状RNA(short hairpin RNA, shRNA)的重组质粒(pshRNA),并在细胞培养系统观察小发卡结构状RNA抗RSV活性以及联合脱氧核酶治疗对RSV复制的抑制效应,为利用基因治疗防治RSV感染的研究奠定基础。第一部分小发卡结构状RNA作用靶点的选择及载体质粒的构建与鉴定目的:选择在RSV转录复制中起重要作用的M2基因作为shRNA干扰的靶点,根据siRNA的设计原则,设计和构建针对RSVM2基因
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