【摘 要】
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本文利用基因工程技术,以结核分支杆菌HRv基因组为模板,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE,通过在大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中表达,首次纯化出可溶性重组结核分支杆菌莽草酸脱
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本文利用基因工程技术,以结核分支杆菌H<,37>Rv基因组为模板,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE,通过在大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中表达,首次纯化出可溶性重组结核分支杆菌莽草酸脱氢酶(SD),在辅酶NADPH作用下该酶催化还原3-脱氢莽草酸生成莽草酸.实验中还对重组SD的包涵体进行了复性研究.重组SD经谷胱甘肽氧化还原梯度透析后无可见沉淀析出,离心后蛋白质回收率为70.7%.结核分支杆菌H<,37>Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆,为该酶的晶体结构分析、免疫学研究及抗结核药物靶点的筛选打下了基础.
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