论文部分内容阅读
目的:膝关节骨关节炎(knee joint osteoarthritis,KOA)是一种引起关节疼痛、肿胀,骨质增生、软骨剥脱及滑膜炎症等一系列改变的中老年慢性、退行性疾病。严重影响中老年人的生活质量。因此KOA的早期预防、延缓病情进展及治疗成为一个重大课题。KOA患者不仅存在关节疼痛、僵硬、活动不利等问题,而且膝关节本体感觉也存在缺陷。膝关节的本体感觉主要来源于膝关节周围的肌肉及关节内各种结构中的机械感受器。其中以前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)中机械感受器的研究最多。有研究报道,年龄也是膝关节本体感觉缺失的一个重要因素,KOA患者的年龄增长与本体感觉缺失是否存在一定的关系,患者ACL中机械感受器的形态与数量又会发生怎样的变化等此类研究比较少见。同时KOA患者的患病严重程度与本体感觉缺失也存在相关性,但是两者之间存在怎样的量化关系,患者ACL中机械感受器的形态及数量有何变化不得而知。因此,本课题的研究目的在于:(1)观察不同年龄段KOA患者ACL中机械感受器的形态及数量变化,寻找年龄与ACL中机械感受器之间存在的量化关系,进而明确年龄与膝关节本体感觉之间的相关性。(2)观察不同严重程度KOA患者ACL中机械感受器的形态及数量变化,寻找两者的量化关系,进而明确KOA严重程度与膝关节本体感觉之间存在的相关性。方法:为排除性别对实验研究的影响,结合临床KOA患者以女性多见等情况,因此,本实验研究所有入选病例均为女性KOA患者,所有患者临床症状均符合美国风湿病学会(American college of rheumatology,ACR)2001年制定的KOA诊断标准。同时,KOA严重程度以Kellgren-Lawrence膝关节骨关节炎影像学为标准,选取符合标准的女性III级KOA患者36例,IV级患者12例,所有患者均自愿接受全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)。36例III级患者按年龄段分为3组,A组(50-60岁,III)、B组(60-70岁,III)、C组(>70岁,III),每组12例;12例IV级患者为D组(>70岁,IV)。其中,每组随机抽取6例进行HE染色,剩余6例进行免疫组织化学研究。所有患者在接受TKA时,截取胫骨止点部位ACL,放入4%的多聚甲醛固定,48-72h后,取出ACL组织,修剪成0.5×0.5×0.5cm的组织块,常规震洗、脱水、浸蜡、石蜡包埋,切片(厚度约5um),HE染色及免疫组织化学染色检测机械感受器帕西尼小体(Pacinian corpuscles,PC)、鲁菲尼末梢(Ruffini endings,RE)、高尔基腱器官(Golgi tedon organ like ending,GTOE)、游离神经末梢(free nerve endings,FNE)的形态及数量。每组6例HE染色,每例随机不连续切片6张,每张切片用JEDA801D图像形态学分析软件,40倍视野下随机选取5个视野,计数每例患者各类机械感受器总数,求得6例患者各类机械感受器均值,并分别比较年龄因素、KOA严重程度对ACL中各类机械感受器的影响及它们之间存在的量化关系;每组6例免疫组织化学染色,计数及分析方法同上,光镜下观察4组患者ACL中各类机械感受器的数量及形态变化。统计学方法分别分析以年龄段分组的A、B、C 3组患者之间ACL中各类机械感受器数量和以KOA严重程度分组的C、D组之间ACL中各类机械感受器数量有无统计学差异。结果:HE染色结果显示,可检测到机械感受器PC。随着患者年龄的增大,PC感受器外15-30层扁平的神经周细胞组成的葱皮状外囊逐渐萎缩,卵圆形或椭圆形的感受器整体缩小变形,最终呈现不规则外形。统计学分析各组机械感受器PC的均值为A组9.33±1.21,B组7.67±1.03,C组2.67±1.03,D组1.00±0.63,按年龄因素A、B、C 3组之间两两比较,均有显著统计学意义(P<0.05)。按KOA严重程度C、D 2组之间比较,两者之间有显著统计学差异(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,可检测到机械感受器RE及FNE。(1)RE结果显示:随着年龄的增长,圆形或卵圆形的感受器,整体外形逐渐缩小,外层薄壁结缔组织囊不规则改变,萎缩变形。统计学分析A组均值14.33±4.08,B组10.33±1.86,C组6.00±2.45,D组2.50±1.23,按年龄因素A、B、C 3组之间两两比较,均有显著统计学意义(P<0.05),按KOA严重程度C、D 2组之间比较,两者之间有显著统计学差异(P<0.05)。(2)FNE结果显示:随着年龄增长,感受器排列紊乱、松散,长轴方向与韧带方向由平行转为不规则排列,整体形态萎缩变形。统计学分析A组均值为22.33±4.08,B组16.50±3.21,C组10.00±3.74,D组5.50±1.05,按年龄因素A、B、C 3组之间两两比较,均有显著统计学差异(P<0.05)。按KOA严重程度C、D 2组之间比较,两者之间有显著统计学差异(P<0.05)。HE染色及免疫组织化学染色,均未检测出机械感受器GTOE。结论:(1)随着年龄的增长,KOA患者ACL中机械感受器形态萎缩变形、数量减少,患者膝关节本体感觉日益下降。(2)KOA患者ACL中机械感受器随着KOA严重程度的增加,萎缩变形、数量减少,患者膝关节本体感觉下降。