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目的:通过检测GDDR mRNA的表达变化,研究低氧环境对GDDR的转录调控,并探讨其可能的机制以及GDDR下调与肿瘤发生发展的相关性。胃癌细胞系转染GDDR表达质粒,观察低氧环境下GDDR对VEGF表达的影响;在正常胃黏膜细胞系应用siRNA干涉GDDR表达,观察VEGF表达情况,探讨GDDR在肿瘤血管生成过程中抑制肿瘤生长的作用。方法:本研究通过启动子双荧光素酶报告系统和Real time PCR实验,观察CoCl2模拟低氧环境模型和细胞低氧孵箱培养模型中GDDR表达变化及其机制;并通过酶联免疫反应吸附试验（ELISA）和Real time PCR实验研究GDDR表达变化在低氧条件下对VEGF转录和翻译的影响。本研究的主要结果如下:1.成功克隆得到人GDDR基因的启动子片段,并将其连入双荧光素酶报告质粒pGL3-Basic中。测序正确后,转染细胞检测发现重组的pGL3-GDDR-Promoter质粒具有启动子活性,可作为GDDR转录调控机制研究的有效工具。2.通过共同转染pGL3-GDDR-Promoter质粒和pcDNA3.1-HIFs表达质粒,发现转录因子HIFs对GDDR基因有转录抑制作用。低氧诱导因子（hypoxia-inducible factors HIFs）在肿瘤发展过程中调控众多靶基因,由此本实验用CoCl2模拟低氧环境,通过Real time PCR方法检测到GDDR基因mRNA转录的下调,进一步在低氧孵箱培养GES-1细胞,行Real time PCR实验证实:低氧环境诱导的HIFs下调GDDR基因的转录表达。3.血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）是HIFs主要的靶基因之一。在CoCl2模拟低氧环境下,应用Real time PCR实验和免疫酶联反应（ELISA）实验发现VEGF在转录和翻译水平表达升高;在低氧孵箱培养细胞模型中得到了相同的结果。说明成功构建两种低氧环境的模型,并能使VEGF的表达升高。4.在成功建模的基础上,低氧环境下培养低表达GDDR基因的SGC-7901细胞系和稳定表达GDDR基因的SGC-7901细胞系,分别检测VEGF在转录和翻译水平表达变化情况发现:GDDR基因表达下调或和缺失的细胞系中VEGF的表达水平显著高于GDDR基因高表达的细胞系,VEGF的表达升高表现在转录和翻译水平。5.为了进一步研究GDDR基因对VEGF的表达变化的影响,实验设计了GDDR基因的siRNA,通过Real time PCR反应证实siRNA的干涉效率满足实验要求。在GDDR基因表达相对较高的GES-1细胞系干涉其表达发现:正常胃黏膜细胞系GES-1细胞中GDDR基因表达下调时,VEGF在转录和翻译水平表达均升高。结论:本课题组首次发现在低氧环境下GDDR基因mRNA水平的下调。体外细胞试验发现:转录因子HIFs一方面促进VEGF表达升高使发挥其促肿瘤作用,另一方面转录因子HIFs又能下调GDDR基因的表达,而下调表达的GDDR基因又能易化VEGF的表达,加剧肿瘤的发展速度。肿瘤发生过程中低氧微环境下调GDDR表达,此结果通过VEGF表达升高使血管生成这一肿瘤发生行为得到发展。此外,研究表明肿瘤细胞中GDDR基因下调或和缺失表达。这些证据提示GDDR基因具有抑制肿瘤发生的生物学效应。