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本文以绿咖啡豆为原料,提取绿原酸,所剩咖啡豆渣制备甘露低聚糖,形成一条绿色环保的绿咖啡豆综合利用工艺。国内外还没有对这一整条前景深远的绿色工艺开展生物研究。本文就以此为切入点,对整条绿色工艺进行研究,分别进行了绿咖啡豆中绿原酸的提取,绿原酸的分离纯化、结构表征和绿咖啡豆提取物减肥功能性试验,酶法制备甘露低聚糖和膜分离甘露低聚糖三大部分内容,结果如下:1.对绿咖啡豆中绿原酸的提取和分离纯化工艺进行了研究。采用热水浸提的方法,重复分批三次提取绿原酸,依据水提法提取绿咖啡豆中绿原酸的单因素实验为基础,采用提取温度、溶剂pH值、料液比和提取时间四个影响因素对水提法提取绿咖啡豆中绿原酸进行响应面设计。利用Box-Behnken中心组合实验设计和响应面分析法,建立二次回归方程。结果表明,四因素对绿咖啡豆中绿原酸得率影响显著,最佳提取条件为:提取温度79.75℃、溶剂pH值2.84、料液比1:6、提取时间3.04 h,所得绿原酸的最大提取得率为92.02%。2.选用吸附量达35.47 mg/mL的XDA-8大孔树脂对绿咖啡豆提取液中的绿原酸进行纯化,实验最佳工艺条件为上样浓度10 mg/mL,上柱液流速2 BV/h,解吸用乙醇浓度70%,乙醇用量5 BV,乙醇流速3 BV/h,XDA-8树脂纯化后所得绿原酸含量可达70.85%,回收率可达85.42%。采用高效液相制备色谱获得了高纯度(95.21%)的绿原酸,并对肥胖大鼠进行了减肥功能应用实验,对于大鼠体重、体重增长及体内脂肪的控制均有明显效果。本研究所建立的绿原酸制备工艺操作简便、高效环保,产品功效明确,具有良好的市场应用前景。3.依据单因素结果,不同来源的β-甘露聚糖酶酶解咖啡豆渣制备甘露低聚糖正交实验对加酶量、酶解温度、酶解pH值和酶解时间四因素进行优化,枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶水解咖啡豆渣制备甘露低聚糖工艺条件最佳组合为:加酶量300 u/g、酶解温度50℃、酶解pH值为6和酶解时间8 h,MOS得率为52.76%。黑曲霉产β-甘露聚糖酶水解咖啡豆渣制备甘露低聚糖工艺条件最佳组合为:加酶量300u/g、酶解温度45℃、酶解pH值为7和酶解时间6 h,MOS得率为61.01%。确定黑曲霉产β-甘露聚糖酶酶解咖啡豆渣制备甘露低聚糖效果较好,酶解液膜分离得甘露低聚糖相对分子量小于1 KDa的DP=3.21,在1 KDa-3 KDa之间的滤液中甘露低聚糖DP值为7.46。黑曲霉产β-甘露聚糖酶酶解咖啡豆渣的酶解液经过PMP衍生化,经HPLC检测,确定甘露低聚糖组成成分为:甘露糖为42.78%,半乳糖为42.58%,阿拉伯糖14.64%。